ЛАКТОФЕНОЛОВО СИНЬО: ХАРАКТЕРИСТИКИ, СЪСТАВ, ПРЕПАРАТ, ПРИЛОЖЕНИЯ - ХИМИЯ - 2025

В синьо lactophenol или синьо памук се получава със свойства единични боядисване. Използва се в клинични лаборатории за оцветяване на гъбични структури като хифи, зародишни тръби и спори.

Той помага при предполагаемата или предварителната диагноза на някои гъбички, но винаги е препоръчително диагнозата да се подсили с по-специфични тестове, като биохимични или серологични тестове.

Графично изображение на лактофенолово синьо петно, оцветяване с лактофенолово синьо, микроскопски монтиран препарат. Източник: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Лактофеноловото синьо се състои от млечна киселина, анилиново синьо, глицерин, фенол и дейонизирана вода. Може да се приготви в лабораторията или да се закупи готов за употреба. След като бъде приготвен, той е готов за употреба, при никакви обстоятелства не трябва да се разрежда, тъй като това действие ще даде ужасни резултати.

Концентрацията на неговите компоненти го прави идеален за оцветяване на гъбични структури, тъй като фенолът елиминира съпътстващата бактериална микробиота, докато млечната киселина създава защитен филм около гъбичната структура. И накрая, анилиновото синьо има афинитет да се придържа към структурите на гъбата.

основа

С лактофенолово синьо се извършва просто оцветяване на гъбичните структури на определена микологична култура. Нарича се просто, защото използва само един оцветител.

Лактофеноловото синьо, освен че оцветява, действа и като избистрител на пробата, благодарение на съвместното действие на млечна киселина и фенол, в допълнение, фенолът се държи като мордант и в същото време предотвратява лизиса на микроорганизма, като инхибира хидролитичните ензими, които може да присъства.

Докато млечната киселина запазва морфологията на структурите на гъбата.

От друга страна, анилиновото синьо има свойството да се прилепва или свързва към структури, съдържащи хитин. Структурите са оцветени в светло синьо.

Трябва да се отбележи, че клетъчната стена на гъбични микроорганизми, особено плесени, съдържа хитин, поради което тази боя е идеална за оцветяване на тези микроорганизми.

характеристики

Разтворът на лактофенол син е силно кисела, леко мътна, водна боя със светлосин цвят. Той остава стабилен, ако се съхранява между 15 ° C и 25 ° C. Бутилката трябва да се държи правилно затворена. Дразнещо и разяждащо за кожата и лигавиците.

композиция

Формулата за приготвяне на един литър лактофенолово синьо е следната:

-250 g / L млечна киселина

-1,0 g / L анилин синьо или метилово синьо

-500 g / L глицерин

-250 g / L фенол

-250 мл дейонизирана или дестилирана вода.

Фенолът се разтваря в предварително затоплената вода. Млечната киселина и глицеринът се добавят и се смесват много добре. Накрая анилиновото синьо се разтваря. Смесва се отново и е готов за употреба.

Порциите за приготвяне на 80 ml разтвор на лактофенол син са:

-20 g фенолни кристали

-20 мл млечна киселина

-40 мл глицерин или глицерол

-20 мл дестилирана вода.

употреба

Използва се за оцветяване на гъбични структури и чрез морфологичните характеристики, наблюдавани на микроскопично ниво, за да може да се постави предполагаема диагноза на гъбата.

процес

Оцветяване на гъбични структури на културите

- Вземете чиста култура на гъбата, чиито структури трябва да се наблюдават.

- За предпочитане да работите в качулка с ламинарен поток или под запалката, като използвате маска и ръкавици, тъй като е необходимо да се спазват стандартите за биологична безопасност, тъй като повечето плесени се разпространяват лесно в околната среда и следователно представляват опасност за оператора.

- Капка лактофенолово синьо се поставя върху слайд.

- Изрежете малък квадрат от качествена лепилна лента и много внимателно я залепете към края на студената стерилизирана платинена дръжка.

- Платинената дръжка се доближава до най-повърхностната част от гъбичната колония и културата се докосва много внимателно, точно там, където се намира лепилната лента.

- След това се отвежда до пързалката и се поставя точно върху капката лактофенолово синьо, като се внимава лентата да бъде перфектно удължена и смазана с багрилото. Платинената дръжка се отстранява много деликатно.

- Още една капка лактофенолово синьо се поставя върху лентата и отгоре се покрива. Не оказвайте прекалено голямо налягане, за да не разрушите структурите на гъбата, тъй като те са изключително крехки. Оцветителят трябва да остави да действа приблизително 3 до 4 минути.

- След това време препаратът е готов да се наблюдава под микроскоп с 10X или 40X увеличение. Ако се изисква 100X наблюдение, трябва да се използва потапящо масло.

- Структурите на гъбата като цяло са оцветени в синьо, с изключение на гъбичките гъби, които ще запазят характерния си кафяв цвят на този вид гъби.

Пряко биологично оцветяване на пробата

Ако е необходимо да се изследва пряка биологична проба, като храчки, гной, ексудати, секрети, наред с други, те трябва да имат предварителна процедура за обеззаразяване на пробата. За това се използва разтвор на NaOH.

В случай на проби от коса, те могат да бъдат боядисани директно.

Няколко засегнати косми (общо 10) са взети от предполагаемите лезии на tinea capitis (алопециални области) и се поставят върху слайд (3 до 4 косъма на слайд). Няколко капки лактофенолово синьо се поставят отгоре и веднага се покриват с покривка.

Хванете пързалката с щипци и леко нагрейте върху горелка. За целта направете 3 до 4 бързи преминавания през пламъка. Наблюдавайте микроскопа при 40X и потърсете спори извън или вътре в косъма (съответно ектотрикс или ендотрикс). Ако е необходимо, добавете потапящо масло и наблюдавайте при 100X.

Оцветяване на зародишна тръба при идентифицирането на

След инкубиране на предполагаемата култура на Candida albicans в човешки серум в продължение на 2 до 4 часа при 37 ° С, се взема част от разтвора и се оцветява с лактофенолово синьо. Препаратът се наблюдава под микроскоп при 40Х. Зародишната тръба присъства и бластоспорите оцветяват ярко синьо.

Информационен лист за безопасност на лактофенола

Националната асоциация за противопожарна защита (NFPA) създава информационния лист за безопасност на химичните вещества по отношение на риска, който той представлява според различни аспекти, които се символизират с цветен ромб и число, вариращо от 0- Четири.

Опасностите за здравето са идентифицирани в синьо, запалимост в червено, нестабилност или реактивност в жълто и всяка специална опасност в бяло.

Здраве

Рискът за здравето, представляван от лактофенолово синьо според NFPA, е ниво 3. Това означава, че веществото е изключително опасно при поглъщане или при директен контакт с кожата или лигавицата.

Това е силно разяждащо и дразнещо вещество.

При контакт с кожата и лигавиците причинява тежки изгаряния.

При поглъщане това може да причини главоболие, объркване, летаргия, безсъзнание, спиране на дишането и дори смърт.

запалимост

Според NFPA, лактофенол синьо е оценено ниво 1 за запалимост. Това означава, че гори само ако се нагрява над 94 ° C.

нестабилност

Изброени съгласно NFPA на ниво 0 (нула) по отношение на реактивността. Това означава, че няма риск от реактивност, тоест е химически стабилно вещество.

Специални опасности

Той не предлага допълнителни специални опасности.

Препратки

1. SAR лаборатория. Лактофенолово синьо. 2010. Достъпно на: labsar.com.
2. Приложна лаборатория по клинична химия. Лактофенолово синьо. 2015.Наличен на: cromakit.es
3. Merck Laboratories. Лактофенолова синя микроскопия в разтвор. 2017.Достъпно на: Потребители / Equipo / Downloads
4. Спешна карта. Лактофенолов син разтвор за оцветяване на гъбички. Universidad Pontificia Javeriana, Богота Колумбия. 2014.Достъпно на: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Техника за оцветяване на гъбични структури с растителни багрила като незамърсяваща алтернатива. Биоагро, 2011; 23 (1): 65-68. Предлага се на адрес: Redalyc.
6. Лабораторна Himedia. Лактофенол памучно син. 2017. Достъпно от: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Actor J, Dasgupta A. Биохимични тестове и техники за оцветяване за микробна идентификация. Science Direct, 2017; 61-73. Предлага се от: Elsevier