МИКРОСКОП С ТЪМНО ПОЛЕ: ХАРАКТЕРИСТИКИ, ЧАСТИ, ФУНКЦИИ - БИОЛОГИЯ - 2025

В микроскоп тъмно поле е специален оптичен уред, използван в някои лаборатории. Това е резултат от модификация, направена на микроскопия с ярко поле. Darkfield микроскопията може да се извърши чрез транс-осветление или чрез епи-осветление.

Първият се основава на блокиране на светлинните лъчи, които директно достигат до кондензатора, чрез използването на устройства, които се намесват преди светлинните лъчи да достигнат до кондензатора.

Микроскоп с тъмно поле / Трепонеми, наблюдавани в микроскопи с тъмно поле. Източник: Dietzel65 / Judith Miklossy, Sandor Kasas, An D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu и Patrick L McGeer

Тъмното поле с предавана светлина дава възможност да се подчертаят структурите, като са в състояние да наблюдават изключително тънки частици. Структурите се виждат с известно пречупване или яркост на тъмен фон.

Докато ефектът на epi-осветление се постига при падаща или наклонена светлина. В този случай микроскопът трябва да бъде оборудван със специален филтър във формата на полумесец.

При падащо осветление наблюдаваните структури се характеризират с представяне на визуален ефект във висок релеф. Това свойство позволява да се подчертаят краищата на суспендираните частици.

За разлика от яркополевата микроскопия, тъмнополевата микроскопия е особено полезна за визуализация на стенописи, съдържащи суспендирани частици, без всякакъв вид оцветяване.

Въпреки това той има няколко недостатъка, включително това, че не може да се използва за сухи препарати или оцветени препарати. Тя няма добра резолюция. Освен това, за да се осигури добро изображение, числената бленда на целите не може да надвишава тази на кондензатора.

характеристики

Съставът на микроскопа с тъмно поле представя важни модификации по отношение на светлото поле, тъй като основите на двете микроскопии са противоположни.

Докато в светлото поле светлинните лъчи са концентрирани така, че да преминават директно през пробата, в тъмното поле лъчите се разпръскват, така че само косите лъчи достигат до пробата. След това те се разпръскват от една и съща проба, предавайки изображението към целта.

Ако се фокусирате върху слайд без проба, ще се наблюдава тъмен кръг, тъй като без проба няма какво да разпръсне светлината към целта.

За да се получи желаният ефект във визуалното поле, е необходимо използването на специфични кондензатори, както и диафрагми, които помагат за контрол на светлинните лъчи.

В тъмно поле на видимост елементите или частиците в суспензия изглеждат ярки и пречупващи, докато останалата част от полето е тъмна, което прави перфектен контраст.

Ако се използва наклонена или падаща светлина, в наблюдаваните конструкции се получава ръб ефект с голям релеф.

Части от микроскопа на тъмното поле

Източник: amazon.com

-Механична система

тръба

Това е устройството, чрез което изображението, отразено и увеличено от обектива, пътува, докато стигне до окуляра или окулярите.

раздвижване

Тя е подкрепата, където се намират различните цели. Целите не са фиксирани, те могат да бъдат премахнати. Револверът може да се върти по такъв начин, че целта да може да бъде променена, когато операторът има нужда от това.

Макро винт

Този винт се използва за фокусиране на образеца, той се премества напред или назад, за да придвижва образеца по-близо или по-далеч от целта, а движението е гротескно.

Микрометров винт

Микрометърният винт се премества напред или назад, за да придвижва образеца по-близо или по-далеч от целта. Микрометричният винт се използва за много фини или деликатни движения, почти незабележими. Той е този, който постига крайния фокус.

тигел

Това е опората, при която екземплярът ще почива върху слайда. Той има централен отвор, през който преминават светлинните лъчи. Когато макро и микрометровите винтове са преместени, етапът продължава нагоре или надолу, в зависимост от движението на винта.

Колата

Превозът позволява да се премине цялата проба с целта. Разрешените движения са назад и напред и обратно, и отляво надясно и обратно.

Държащи щипци

Те са разположени на сцената, изработени са от метал и тяхната функция е да задържат слайда, за да не се търкаля по време на наблюдение. Важно е пробата да остане фиксирана, докато се наблюдава. Закопчалките са точно оразмерени, за да получат слайда.

Ръце или дръжка

Ръката съединява тръбата с основата. Това е мястото, където трябва да се държи микроскопът, когато той ще бъде преместен от едната страна на другата. С едната ръка се хваща ръката, а с другата се държи основата.

Основа или крак

Както подсказва името му, той е основата или опората на микроскопа. Благодарение на основата, микроскопът е в състояние да остане неподвижен и стабилен върху равна повърхност.

-Оптична система

цели

Те са с цилиндрична форма. Те имат леща в долната част, която увеличава изображението, което идва от пробата. Целите могат да бъдат с различни увеличения. Пример: 4.5X (лупа), 10X, 40X и 100X (потапяне цел).

Целта на потапянето е наречена така, защото изисква поставяне на няколко капки масло между целта и пробата. Останалите се наричат ​​сухи мишени.

Целите се отпечатват с характеристиките, които имат.

Пример: марка на производителя, корекция на кривината на полето, корекция на отклонението, увеличение, числена бленда, специални оптични свойства, потапяща среда, дължина на тръбата, фокусно разстояние, дебелина на покривката и кодов пръстен цвят.

Лещите имат предна леща, разположена в долната част, и задна леща, разположена в горната част.

Окуляри

Старите микроскопи са монокуларни, тоест имат само един окуляр, а съвременните микроскопи са бинокли, тоест имат два окуляра.

Окулярите са с цилиндрична и куха форма. Те имат конвергентни лещи вътре, които разширяват виртуалното изображение, създадено от обектива.

Окулярът се присъединява към тръбата. Последното позволява изображението, предавано от целта, да достигне до окуляра, което ще го увеличи отново.

Окулярът в горната си част съдържа леща, наречена окуляр, а в долната си част е разположена леща, наречена колектор.

Освен това има диафрагма и в зависимост от това къде се намира, ще има име. Тези, които са разположени между двете лещи, се наричат ​​окуляр на Хюйгенс и ако е разположен след двете лещи, той се нарича окуляр Рамсден. Въпреки че има много други.

Увеличението на окуляра варира между 5X, 10X, 15X или 20X, в зависимост от микроскопа.

Чрез окуляра или окулярите операторът може да види пробата. Някои модели се предлагат с пръстен на левия окуляр, който е подвижен и позволява настройка на изображението. Този регулируем пръстен се нарича диоптър пръстен.

-Светлителна система

лампа

Той е източникът на осветление и се намира в долната част на микроскопа. Светлината е халогенна и се излъчва отдолу нагоре. По принцип лампата, която микроскопите имат, е 12 V.

диафрагма

В диафрагмата на микроскопите с тъмно поле липсва ирис; в този случай това не позволява лъчите, идващи от лампата, да достигнат директно до пробата, само косите лъчи ще докоснат образеца. Онези лъчи, които са разпръснати от структурите, присъстващи в пробата, са тези, които ще преминат целта.

Това обяснява защо структурите изглеждат ярки и светещи в тъмно поле.

кондензатор

Кондензаторът на микроскоп с тъмно поле се различава от този на светло поле.

Има два вида: пречупващи кондензатори и рефлекторни кондензатори. Последният от своя страна е разделен на две категории: параболоиди и кардиоиди.

Рефракционни кондензатори

Този тип кондензатор има диск, който е разположен за пречупване на светлинни лъчи, може да бъде разположен над предната леща или от задната страна.

Много лесно е да се импровизира кондензатор от този тип, тъй като е достатъчно да поставите пред предната леща на кондензатора диск, изработен от черен картон, който е по-малък от лещата (диафрагмата).

Светлинен микроскоп с ярко поле може да бъде превърнат в микроскоп с тъмно поле с помощта на този съвет.

Отражателни кондензатори

Те са тези, използвани от стереоскопични микроскопи. Има два вида: параболоиди и кардиоиди.

• Параболоиди: имат вид кривина, наречена параболоиди, поради приликата им с парабола. Този тип кондензатор се използва широко при изследване на сифилис, тъй като позволява да се наблюдават Treponemes.
• Кардиоид: кривината на кондензатора е подобна на сърце, оттук и името "кардиоид", кондензаторът със същото име. Той има диафрагма, която се регулира.

Характеристика

-Използва се за изследване на наличието на Treponema pallidum в клинични проби.

-Полезно е също да наблюдавате Борелиас и Лептоспира.

-Той е идеален за наблюдение на in vivo поведението на клетки или микроорганизми, стига да не е необходимо да се детайлизират специфични структури.

-Идеално е да подчертаете капсулата или стената на микроорганизмите.

предимство

-Темните полеви микроскопи с пречупващ кондензатор са по-евтини.

-Използването му е много полезно при увеличение 40X.

-Идеални са за наблюдение на проби, които имат показател на пречупване, подобен на средата, където са открити. Например клетки в култура, дрожди или подвижни бактерии като спирохети (борелии, лептоспири и трепонеми).

-Клетката може да се наблюдава in vivo, което позволява да се оцени нейното поведение. Например, броуновско движение, движение по джгутици, движение чрез излъчване на псевдоподи, процес на митотично деление, излюпване на ларви, пъпкуване на дрожди, фагоцитоза и др.

-Позволява да се подчертаят краищата на структурите, например капсулата и клетъчната стена.

-Възможно е да се анализират разделени частици.

-Употребата на оцветители не е необходима.

Недостатъци

-При монтажа на препаратите трябва да се внимава особено, тъй като ако те са твърде дебели, няма да се наблюдават добре.

-Резолюстрирането на изображенията е ниско.

-Мясните полеви микроскопи, които използват пречупващи кондензатори, имат много нисък процент светимост.

-За да се подобри качеството на изображението с цел потапяне (100X), е необходимо да се намали числовата бленда на целите и по този начин да се увеличи тази на светещия конус. За това е важно да се включи допълнителна диафрагма, която може да регулира числената бленда на обектива.

-Не можете да визуализирате сухи препарати или оцветени препарати, освен ако не са жизненоважни оцветители.

-Не позволява визуализацията на определени структури, особено на вътрешни.

-Мъмковите полеви микроскопи са по-скъпи.

Препратки

1. "Микроскоп с тъмно поле." Уикипедия, Свободната енциклопедия. 26 август 2018, 00:18 UTC. 30 юни 2019, 01:06
2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Диагностика на лептоспироза от кръвни проби и култура чрез наблюдение под микроскоп с тъмно поле. Biomedical. 2008; 28 (1): 7-9. Достъпно от: scielo.org
3. Rodríguez F. Видове оптични микроскопи. Блог на клиничната и биомедицинска лаборатория. Достъпно на: franrzmn.com
4. Сътрудници на Уикипедия Микроскопия с тъмно поле. Уикипедия, Свободната енциклопедия. 19 октомври 2018 г., 00:13 UTC. Достъпно на: wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. Оценка на микроскопия на тъмно поле, култура и търговски серологични комплекти при диагностика на лептоспироза. Индийски J Med Microbiol. 2015; 33 (3): 416-21. Достъпно в: nlm.nih.gov