- Какво е нефелометрия?
- Дисперсия на радиация чрез частици в разтвор
- нефелометрични
- ДА СЕ.
- Б.
- ° С.
- Д.
- И.
- Отклонения
- Метрологични характеристики
- Приложения
- Откриване на имунен комплекс
- Нефелометрия на крайна точка:
- Кинетична нефелометрия
- Други приложения
- Препратки
В нефелометрия включва измерване на радиацията, причинени от частици (в разтвор или суспензия) и измерване на силата на разсеяна радиация под ъгъл спрямо посоката на падащото лъчение.
Когато суспендираната частица е ударена от лъч светлина, има част от светлината, която се отразява, друга част се абсорбира, друга се отклонява, а останалата част се предава. Ето защо, когато светлината удари прозрачна среда, в която има суспензия от твърди частици, суспензията изглежда мътна.
Какво е нефелометрия?
Дисперсия на радиация чрез частици в разтвор
В момента, в който светлинен лъч удари частиците на суспендирано вещество, посоката на разпространение на лъча променя посоката си. Този ефект зависи от следното:
1.Размери на частицата (размер и форма).
2. Характеристики на суспензията (концентрация).
3. Дължина на вълната и интензитет на светлината.
4.Небрежно светлинно разстояние.
5. Ъгъл на откриване.
6. Индекс на пречупване на средата.
нефелометрични
Нефелометърът е инструмент, използван за измерване на суспендирани частици в течна проба или в газ. По този начин фотоклетка, поставена под ъгъл 90 ° към източник на светлина, открива радиация от частици, присъстващи в суспензията.
По същия начин светлината, отразена от частиците към фотоклетката, зависи от плътността на частиците. На диаграма 1 са представени основните компоненти, съставляващи нефелометър:
Фигура 1. Основни компоненти на нефелометър.
ДА СЕ.
В нефелометрията е от жизненоважно значение да има източник на радиация с висока светлинна мощност. Има различни видове, вариращи от ксенонови лампи и живачни лампи, живи халогенни лампи, лазерно излъчване и др.
Б.
Тази система е разположена между източника на излъчване и кюветата, така че по този начин се избягва излъчване с различна дължина на вълната в сравнение с желаната радиация върху кюветата.
В противен случай флуоресцентните реакции или нагряващите ефекти в разтвора могат да причинят отклонения в измерването.
° С.
Това е обикновено призматичен или цилиндричен контейнер и може да има различни размери. В това е изследваното решение.
Д.
Детекторът е разположен на определено разстояние (обикновено много близо до кюветата) и отговаря за откриване на радиацията, разпръсната от частиците в суспензията.
И.
Като цяло това е електронна машина, която приема, преобразува и обработва данни, които в този случай са измерванията, получени от проведеното проучване.
Отклонения
Всяко измерване е подложено на процент грешка, който се дава главно от:
Замърсени клетки: в клетките всеки агент, външен за изследвания разтвор, независимо дали е вътре или извън клетката, намалява сияещата светлина по пътя към детектора (дефектни клетки, прилепнал прах към стените на клетката).
Интерференции: наличието на микробен замърсител или мътност разпръсква лъчевата енергия, увеличавайки интензивността на дисперсията.
Флуоресцентни съединения: това са онези съединения, които, когато се възбуждат от инцидентно излъчване, предизвикват погрешни и високи показания за плътност на разсейване.
Съхранение на реагентите: Неадекватната температура на системата може да причини неблагоприятни условия на изследване и да доведе до наличието на мътни или утаени реагенти.
Колебания в електроенергията: за да се предотврати възникването на грешка от случайно излъчване, за равномерно излъчване се препоръчват стабилизатори на напрежението.
Метрологични характеристики
Тъй като силата на излъчване на откритата радиация е пряко пропорционална на масовата концентрация на частиците, на теория нефелометричните изследвания имат по-висока метрологична чувствителност в сравнение с други подобни методи (като турбидиметрия).
Освен това тази техника изисква разредени разтвори. Това позволява да се сведат до минимум явленията на поглъщане и отражение.
Приложения
Нефелометричните изследвания заемат много важно място в клиничните лаборатории. Приложенията варират от определянето на имуноглобулини и протеини в остра фаза, допълване и коагулация.
Откриване на имунен комплекс
Когато биологична проба съдържа антиген, който представлява интерес, тя се смесва (в буферен разтвор) с антитяло, за да се образува имунен комплекс.
Нефелометрията измерва количеството светлина, която се разсейва от реакцията антиген-антитяло (Ag-Ac) и по този начин се откриват имунни комплекси.
Това проучване може да се извърши по два метода:
Нефелометрия на крайна точка:
Тази техника може да се използва за анализ на крайната точка, при която антитялото на изследваната биологична проба се инкубира в продължение на двадесет и четири часа.
Комплексът Ag-Ac се измерва с помощта на нефелометър и количеството разсеяна светлина се сравнява със същото измерване, извършено преди образуването на комплекса.
Кинетична нефелометрия
При този метод скоростта на образуване на комплекс се следи непрекъснато. Скоростта на реакцията зависи от концентрацията на антигена в пробата. Тук измерванията се приемат като функция на времето, така че първото измерване се извършва във времето "нула" (t = 0).
Кинетичната нефелометрия е най-използваната техника, тъй като изследването може да се извърши за 1 час, в сравнение с дългия период от време на метода на крайната точка. Съотношението на дисперсия се измерва непосредствено след добавяне на реагента.
Следователно, докато реагентът е постоянен, количеството на наличния антиген се счита за пряко пропорционално на скоростта на промяна.
Други приложения
Обикновено нефелометрията се използва в химическия анализ на качеството на водата, за да се определи яснотата и да се контролират процесите на пречистване.
Използва се и за измерване на замърсяването на въздуха, при което концентрацията на частиците се определя от дисперсията, която те произвеждат в падаща светлина.
Препратки
- Britannica, E. (nd). Нефелометрия и турбидиметрия. Възстановени от britannica.com
- Al-Saleh, M. (nd). Турбидиметрия и нефелометрия. Извлечено от pdfs.semanticscholar.org
- Bangs Laboratories, Inc. (nd). Възстановени от technochemical.com
- Мораис, IV (2006). Турбидиметричен и нефелометричен анализ на потока. Получава се от repository.ucp.p
- Sasson, S. (2014). Принципи на нефелометрията и турбидиметрията. Възстановено от notesonimmunology.files.wordpress.com
- Stanley, J. (2002). Основи на имунологията и серологията. Олбани, Ню Йорк: Томпсън учене. Получено от books.google.co.ve
- Wikipedia. (SF). Нефелометрия (лекарство). Възстановено от en.wikipedia.org