КРЪСТОСАНИ ТЕСТОВЕ: ЗА КАКВО СА, ТЕХНИКА, ОБОСНОВКА, ФАЗИ - ЛЕКАРСТВО - 2025

Най- кръстосаната проба на редица лабораторни изследвания се провеждат, за да се определи дали кръвни продукти от донор (най-вече на цяла кръв и опаковани кълбовидни) са съвместими с кръвта на получателя.

Това е допълнителен допълнителен тест за съвместимост с ABO и Rh фактор. Причината за кръстосано съвпадение е, че понякога двама души (донор-реципиент) могат да имат една и съща група ABO и Rh, но въпреки това кръвта им е несъвместима.

Източник: unsplash.com

Такава несъвместимост се дължи на наличието на антитела срещу серия протеини от червени кръвни клетки, известни като незначителни антигени. Тези антигени не се тестват рутинно, тъй като са за кръвна група (ABO) и Rh фактор.

Това е така, защото незначителните антигени са много по-редки и имат променлива експресия при всеки индивид, следователно е практически невъзможно да ги групирате в категории, както се прави с групата и Rh фактора.

Вместо това червените клетки на донора се смесват с серума на пациента (тест на главния мач) и червените клетки на пациента с донорния серум (тест с маловажно съвпадение), за да се открие наличието на реакции антиген-антитяло.

Когато има антитела срещу незначителни антигени, или в серума на пациента, или в донора, се казва, че тестът е положителен, така че в повечето случаи не може да се прелее определена единица кръв.

ABO Group

За да разберете напълно какви са кръстосаните реакции, първо трябва да знаете основите на кръвните групи.

В този смисъл най-важното е да се знае, че кръвта може да бъде класифицирана в четири групи: A, B, AB и O.

Всяка от тези групи експресира на повърхността на червените кръвни клетки определен протеин (антиген), който се идентифицира като чужд елемент от антителата на потенциален рецептор от различна група.

Най-поразителното при реакциите антиген-антитела при съвпадение на кръв е, че не е необходимо предварително излагане на антигена, за да съществуват антитела. Това е известно като естествени антитела.

Естествени антитела

Като цяло, за да съществуват антитела в организма на индивида, е необходимо белите кръвни клетки на индивида да са били предварително изложени на антигена.

Това означава, че при първия контакт между чуждия антиген и организма няма антитела, тъй като те се генерират по-късно, след първоначалния контакт. Следователно е невъзможно за имунната система да има антитела, например срещу определен вирус, ако той не е бил изложен на него в миналото.

Единственото изключение от горното са анти-АВ антигени. В тези случаи човекът има антитела срещу антигена, които техните червени кръвни клетки нямат, въпреки че никога не са били в контакт с червените кръвни клетки на друг човек. Това е известно като естествени антитела.

Антигени и антитела, свързани с кръвната група

Кръвните групи се определят в случай на ABO система чрез наличието на специфични антигени (A или B) върху мембраната на червените кръвни клетки и, за разлика от тях, антитела срещу отсъстващия антиген върху мембраната на еритроцитите.

По този начин човек с кръвна група А експресира антиген А на повърхността на червените си кръвни клетки, докато в серума има анти-В антитела.

Напротив, при пациенти от група В антигенът на В се намира, докато антителата са анти-А.

Сега пациентите с АБ кръв имат антигени А и В. Следователно, няма антитела, тъй като това би унищожило червените кръвни клетки на този човек.

Точно обратното се случва в група O, където еритроцитната мембрана не съдържа нито един от двата антигена (нито А, нито В), докато в серума има анти-А и анти-В антитела.

Несъвместимост на група ABO

От гореизложеното съвместимостта на кръвните групи от ABO може лесно да се направи, тъй като чрез познаване на антигена на еритроцитната мембрана, антителата в серума се познават автоматично. Така че:

- Кръвта А е съвместима с група А и група О.

- Кръвната група В е съвместима с кръв В и О.

- Хората с група O могат да получават само O кръв (тъй като имат анти-А и анти-В антитела), въпреки че кръвта им се получава от всички останали групи без проблеми, тъй като липсват антигени.

- Накрая. тези, които имат кръвна група AB, могат да получат кръв от всички останали групи (A, B, O и разбира се AB), тъй като нямат антитела срещу някой от антигените. Въпреки това, само хора от група AB могат да получат АБ кръв, тъй като всички останали групи имат антитела, които биха унищожили тези червени кръвни клетки.

Незначителни антигени

Както при АВО групите, поредица от протеини може да се намери на повърхността на еритроцитите, които функционират като антигени по същия начин като антигените от групата на АВО.

Тези антигени обаче не присъстват при всички индивиди. Тяхната комбинация е хетерогенна и проникването (ниво на експресия на протеин) е променливо, следователно класификация в групи като тази, която съществува за АВО и Rh е невъзможна. Това е мястото, от което произлиза името си от „дребни антигени“, известни още като „антигени с ниска честота“.

Въпреки че не са чести, може да има естествени антитела срещу незначителни антигени. Сред тях най-често срещаните са Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb и Kidd. Всички те са отговорни за много сериозни хемолитични и посттрансфузионни реакции.

В допълнение, може да има случай на сенсибилизация срещу незначителни антигени при предишен контакт, или със споменатите антигенни протеини поради предишни трансфузии, или поради кръстосан имунитет.

Кръстов имунитет

Казва се, че има кръстосан имунитет, когато два антигена от два различни източника (например червено кръвно и бактерия) са много сходни, до степен, че антителата срещу един от тези антигенни протеини също реагират с другия, тъй като са почти идентични, За да разберете това по-добре, вземете предишния хипотетичен пример (антигени от червени кръвни клетки и бактерия). И в двата случая няма естествени антитела, но ако човек е изложен на бактериите, той ще генерира антитела срещу него.

По-късно такива антитела ще реагират срещу червени кръвни клетки, ако антигените върху червената кръвна клетка са много подобни на тези на бактериите, които са предизвикали образуването на антителата.

Ако това се случи, червените кръвни клетки с този конкретен антигенен протеин не могат да бъдат давани на човека, който има антителата, тъй като би имало отхвърляне. В това се крие значението на кръстосаните реакции.

За какво е кръстосване?

Тъй като е невъзможно да се групира кръвта на различни индивиди въз основа на дребните антигени, единственият начин да се разбере дали има антитела срещу незначителните антигени на червените кръвни клетки на друг човек в кръвта на един човек е чрез кръстосано съвпадение., В случаите, когато има антитела, се задейства реакция на хемолиза или аглутинация, поради което се прави изводът, че реакцията е положителна; тоест има антитела срещу незначителни антигени (въпреки че не се знае точно кой от тях). В противен случай тестът е отрицателен.

основа

Кръстките се основават на реакцията антиген-антитяло. Следователно с тях е възможно да се установи дали в серума на реципиент има антитела срещу антигените на червените кръвни клетки на донора (или обратно), предизвиквайки реакция антиген-антитяло.

Ако няма антитела, не възниква реакция и тестът се отчита отрицателен. Напротив, ако реакцията е положителна (има хемолиза или аглутинация по време на теста), може да се заключи, че антителата присъстват.

В този смисъл е важно да се отбележи, че може да има антитела срещу червените кръвни клетки както в серума на донора, така и в реципиента. Ето защо има два вида кръстосани реакции.

Видове кръстосани реакции

Антитела срещу донорски еритроцити могат да съществуват в серума на пациента; но може да се случи и обратното, тоест антитела в серума на донора срещу червените кръвни клетки на пациента.

Ето защо има два вида кръстосано съвпадение:

- Основен кросматч.

- Малък кръстосан кръст.

И двата типа се извършват рутинно в банката на кръвта преди трансфузия на кръвни продукти, тъй като ако някой от тестовете е положителен, съществува висок риск от трансфузионни реакции, които могат да застрашат живота на пациента.

Основно кръстосване

Този тест оценява дали серумът на реципиента съдържа антитела към червените кръвни клетки на донора.

Ако това се случи, кръвните продукти не могат да се прилагат, тъй като голямо количество антитела, присъстващи в плазмата на пациента, ще унищожи червените кръвни клетки на донора много бързо, генерирайки катастрофални реакции в тялото на реципиента. Тези реакции са толкова тежки, че могат да бъдат опасни за живота.

Незначителна кръстосана връзка

В този случай се определя дали има антитела срещу червените кръвни клетки на реципиента в серума на донора.

Ако е така, антителата ще започнат да унищожават еритроцитите на реципиента. Въпреки това, като се има предвид, че количеството на антителата е ограничено, реакцията е по-малко интензивна; въпреки че все още е опасно.

Фази

Както основният, така и второстепенният кръстосан кръст са разделени на три фази:

- физиологичен разтвор.

- Термична или инкубационна.

- Coombs.

В първата фаза червените кръвни клетки и серумът се смесват в физиологичен разтвор. Впоследствие се добавя албумин и пробата се инкубира при 37 ° С в продължение на 30 минути, за да се премине най-накрая към фазата на коумбите.

Техника

Техниката на кръстосано съвпадение е сравнително проста, тъй като включва добавяне на червени кръвни клетки на донора към серума на пациента (главно кръстосано съвпадение), както и еритроцитите на реципиента към донорния серум (незначително кръстосано съвпадение).

За да се предизвика реакцията антиген-антитяло за сравнително кратко време, трябва да се следва серия от стандартизирани стъпки. Тези стъпки са обобщени по опростен начин по-долу.

Важно е да се отбележи, че следващият раздел описва основния тест за съвместимост, въпреки че стъпките са едни и същи за теста за незначителна съвместимост, но обменят произхода на червените кръвни клетки и серума.

Солна фаза

- Добавете в епруветка 2 капки серум от получателя (от донора, ако това е второстепенното кръстосване).

- Вземете проба от червени кръвни клетки от донора (от получателя, ако това е второстепенното кръстосване).

- Измийте и центрофугирайте червените кръвни клетки.

- Повторно използване в разтвор между 3% и 5%.

- Поставете капка от този разтвор в епруветката, съдържаща серума на получателя.

- Разбъркайте внимателно.

- Центрофуга.

- Прочетете резултата в дисплейната лампа.

Топлинна фаза

- Добавете 2 капки 22% албумин в епруветката, в която е завършена физиологичната фаза.

- Инкубирайте при 37ºC за 30 минути.

- Центрофуга за 15 секунди.

- Прочетете резултата в дисплейната лампа.

Фаза на Кумбс

- Вземете клетките от епруветката и ги измийте с физиологичен разтвор.

- Елиминирайте супернатантата.

- Добавете две капки реактив на Кумбс.

- Разбъркайте внимателно.

- Центрофуга за 15 до 30 секунди.

- Ресуспендирайте клетките и оценете в зрителната лампа за аглутинация или хемолиза.

Ако има аглутинация или хемолиза в някоя от фазите, резултатът се счита за положителен.

Препратки

1. Hall, TC, Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C., & Dennison, AR (2013). Политики за кръвопреливане в избираемата обща хирургия: как да се оптимизират съотношенията между кръстосани и трансфузионни. Трансфузионна медицина и хемотерапия, 40 (1), 27-31.
2. Silvergleid, AJ, Wells, RF, Hafleigh, EB, Korn, G., Kellner, JJ, & Grumet, FC (1978). Тест за съвместимост с използване на червени кръвни клетки, обозначени с хром, при пациенти с кръстосано съвпадение. Трансфузия, 18 (1), 8-14.
3. Kulkarni, N., Ali, M., Haray, PN, Joseph, A., & Masoud, A. (2006). Електронна система за кръстосано съвпадение. Необходимо ли е рутинно предоперативно кръстосано съвпадение на кръвта за колоректални резекции ?. Ендоскопия, 38 (11), Постер_50.
4. Heal, JM, Blumberg, N., & Masel, D. (1987). Оценка на кръстосано съвпадение, HLA и ABO съвпадение при трансфузия на тромбоцити на рефрактерни пациенти. Кръв, 70 (1), 23-30.
5. Arslan, Ö. (2006 г.). Електронно кръстосване. Прегледи за трансфузионна медицина, 20 (1), 75-79.
6. Wu, KK, Hoak, JC, Koepke, JA, & Thompson, JS (1977). Избор на съвместими донори на тромбоцити: проспективна оценка на три техники за кръстосано съвпадение. Трансфузия, 17 (6), 638-643.
7. Schonewille, H., Zijl, AMV, & Wijermans, PW (2003). Значението на антителата срещу нискочестотни RBC антигени в пълно и съкратено кръстосано съвпадение. Трансфузия, 43 (7), 939-944.