ТЕХНИКА НА ФАУСТ: ОСНОВА И МАТЕРИАЛИ, СТЪПКИ, ПРЕДИМСТВА, НЕДОСТАТЪЦИ - ЛЕКАРСТВО - 2024

В техниката Faust е методология, която позволява концентрацията на яйца и / или ларви на паразити, които се съдържат в изпражненията от плаващ. Използва се, когато директните копропаразитологични тестове са отрицателни или когато искате да получите чисти проби без детрит.

Методите за концентрация за копропаразитологични изследвания са от три вида: чрез флотация, чрез утаяване или чрез методи, които комбинират предишните два. Тези методи увеличават шансовете за положителни резултати.

Анализ на изпражненията.

Методът на Фауст се състои в смесване на част от пробата на изпражненията с вещество, по-плътно от яйцата или паразитите, които трябва да бъдат концентрирани. Това причинява, че като са по-малко плътни, те плуват по повърхността. Супернатантната течност се събира и гледа под микроскоп за идентификация и количествено определяне.

Този метод се използва за визуализиране на яйца на хелминти. В същото време той се оказа много чувствителен метод за диагностициране на Giardia lamblia - бигулиран протозой, който е широко разпространен в целия свят. Флотационните методи не се препоръчват за много тежки яйца от паразити, като тения и трематоди.

Паразитите са една от най-разпространените чревни инфекции в световен мащаб, особено в бедните страни с лоши санитарни мерки. Поради тази причина наличието на чувствителни методи за идентифициране и количествено определяне на тези паразити е много полезно за диагностика и лечение.

Фондация и материали

Техниката се основава на съществуването на различни специфични гравитации на яйца, паразити, кисти, ларви и детрит, като се използва разтвор на цинков сулфат като флотационен метод.

Обосновката на техниката е смесването на пробата с разтвор на цинков сулфат, който има по-висока плътност от по-светлите яйца, ларви или паразити.

Това позволява по-тежките елементи да се утаяват, а по-леките да плуват, които се появяват в супернатантата след центрофугиране на пробите.

материали

Контейнери за събиране на фекални проби (Източник: Bobjgalindo чрез Wikimedia Commons)

- Пригответе разтвор на цинков сулфат с плътност 1,18 или 1,2 g / ml, ако пробата е била предварително обработена.

- Подгответе багажник с предварително маркирани епруветки.

- Имайте центробежна машина.

- Под ръка да имате слайдове за микроскоп и капаци. Всички трябва да бъдат етикетирани

- Уверете се, че е наличен разтвор на Lugol за оцветяване на листовете.

- Имате марля, която да филтрирате.

- Имайте фунии и дестилирана вода.

- Намерете етикетирани пластмасови или картонени контейнери.

- Също така апликатори и стерилна дръжка от 5 мм.

- Запалка за стерилизиране на дръжката.

стъпки

Макроскопско и микроскопично изследване

При всяко изследване на изпражненията, изследването започва с това, което се нарича "груб преглед" на пробите.

Описани са консистенцията, цветът, присъствието на кръвта, слузта и паразитите на възрастни.

След това пристъпваме към "микроскопичното изследване" на изпражненията, това зависи от метода. Най-простият е методът за директно намазване, който е най-простият микроскопичен метод за наблюдение на паразити.

Снимка от наблюдението на Gardia lamblia, чревен паразит (Източник: Riddlemaster via Wikimedia Commons)

Процедурата включва поставяне на малко количество от пробата директно върху слайд. Поставете няколко капки физиологичен разтвор, които трябва да бъдат сходни по размер с пробата. Смесете физиологичния разтвор със изпражненията, докато се образува хомогенна смес. Поставете покривало и изследвайте под микроскоп.

Оригинална техника на Фауст

Втората процедура се състои от метода на поплавък Фауст, чиято оригинална версия се състои от:

1- Поставете около два грама изпражнения в подходящ контейнер за тази цел.

2- Добавете 30 ml флотационен разтвор на цинков сулфат, с който се прави емулсия чрез смесване на разтвора с изпражненията.

3- Прецедете с метална цедка във втори контейнер и прехвърлете в епруветка.

4- Добавете още флотационен разтвор, докато в епруветката се образува менискус.

5- Поставете стъклен капак върху менискуса. Оставете го да почива 10 до 15 минути.

6- Извадете покривалото и го поставете върху слайд, който ще бъде изследван под микроскоп.

Техника на Фауст чрез центрофугиране

Първоначално методът не е използвал центрофугиране, но сега е включен, тъй като са получени по-добри резултати. Техниката включва поредица от стъпки за постигане на правилна процедура, които са следните:

1- Фекалиите се промиват с вода, смесват се добре и след това се филтрират с марля, сгъната на четири. Пробата се поставя в епруветка.

2- Центрофугирайте и отстранете супернатантата (проби, които се държат над водата). Стъпки 1 и 2 се повтарят, докато супернатантата не се „изчисти“.

3- Цинков сулфат се добавя към филтрираната и центрофугирана проба.

4- Смесва се добре.

5- Центрофуга отново за 1 минута при 2500 об / мин (обороти в минута).

6- Супернатантата се възстановява със стерилен контур от около 5 mm; тръбите не трябва да се разклащат.

7- Пробата, получена от супернатантата, се поставя върху слайд и капка Lugol може да бъде поставена за оцветяване, покривката се поставя и наблюдава под микроскоп.

8- Контейнерите и епруветките са етикетирани.

предимство

- Елементите, използвани за диагнозата, могат да се видят чисти и без „детрит“, това улеснява наблюдението на листа и намалява времето, използвано за диагнозата.

- В супернатантата се възстановяват както ларвите, яйцата и / или кистите.

- Това е метод с много ниски разходи.

- Процедурата е много проста и лесна за изпълнение.

- Диагнозата е бърза и точна.

- Поради значението и високата честота на паразитозите в бедните страни, тези евтини и лесни за използване методи са идеални за диагностика и мониторинг на тези патологии.

Недостатъци

Плътността на флотационния разтвор произвежда свиване на ларвите, тоест те се свиват и за много кратък период могат да се деформират. Това принуждава изследващия да постави диагнозата незабавно и третираните проби не могат да бъдат държани за бъдещи прегледи.

Както при всички микроскопични методи за идентификация, за извършване на точни диагнози е необходим опитен персонал, който проверява.

Бързата деформация на елементите, необходими за диагнозата, въпреки че те са очевиден недостатък, може да бъде преодоляна чрез незабавни микроскопични наблюдения.

Препратки

1. Ananias, FL (2017). Оценка на чувствителността на метода на Фауст и спонтанно утаяване за диагностициране на лямблиоза. Cuban Journal of Tropical Medicine, 68 (2).
2. Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Сравнителна оценка на модифицирана техника на флотация на цинков сулфат. Списание за клинична микробиология, 7 (6), 524-528.
3. Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Чувствителност и ефективност на избрани копроскопски методи-утаяване, комбинирано утаяване-флотация на цинков сулфат и метод на McMaster. Паразитологични изследвания, 115 (7), 2581-2587.
4. Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Лабораторна диагностика на паразити от стомашно-чревния тракт. Прегледи за клинична микробиология, 31 (1), e00025-17.
5. Summers, WA (1942). Модификация на метод на центробежна флотация на цинков сулфат за възстановяване на хелминтови яйцеклетки в формализирани изпражнения. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.