- Багрила, използвани при просто оцветяване
- Шестте стъпки към простото оцветяване
- Етап 1
- наблюдение
- Стъпка 2
- наблюдение
- Стъпка 3
- Стъпка 4
- наблюдение
- Стъпка 5
- Препратки
Най- единствен оцветяване е оцветяване процедура бързо и лесно, в които се използва един единствен боя, така че той се нарича просто. Използва се главно за определяне на морфологията и организацията на клетките, присъстващи в пробата.
Клетките са естествено безцветни, така че е необходимо да се направят видими по някакъв начин, когато се гледат под микроскоп.
Клетките на човешките бузи, оцветени чрез обикновено оцветяване с метиленово синьо.
Важно е да се отбележи, че багрилата, използвани при просто оцветяване, трябва да са основни с положителен заряд (катион), така че да могат да се свързват спонтанно с клетъчната стена и цитоплазма.
Тези клетъчни структури са отрицателно заредени. Ето защо положително зареденото багрило се привлича към клетките и се свързва спонтанно с тях. По този начин всички клетки, присъстващи в пробата, бързо се оцветяват.
Багрила, използвани при просто оцветяване
Има няколко основни петна, които могат да бъдат използвани в лабораторията по микробиология. Най-използваните са:
- метиленово синьо.
- Кристална виолетка.
- Малахитово зелено.
- Основен фуксин.
Всички тези багрила работят добре в бактериите, тъй като имат положително заредени (катионни) цветни йони (хромофори).
Времето за оцветяване на повечето от тези петна е сравнително кратко. Те обикновено варират от 30 секунди до 2 минути, в зависимост от афинитета на багрилото.
Важно е да се има предвид, че преди оцветяването на пробата чрез просто оцветяване, тя трябва да бъде удължена и фиксирана към стъклената пързалка (слайд); удължената и фиксирана проба се нарича намазка.
Шестте стъпки към простото оцветяване
Етап 1
Поставете пързалката върху стелаж за оцветяване и нанесете желаното петно. Нека съответното време действа.
Обикновено оцветяването обикновено отнема няколко секунди до няколко минути, в зависимост от използваното петно.
наблюдение
В тази стъпка е важно да не се надвишава препоръчаното време за използваното багрило, тъй като върху листа могат да се образуват кристали, произвеждащи онези, известни като "артефакти", които нарушават морфологията на клетките.
Стъпка 2
Измийте внимателно намазката от пързалката с дестилирана вода от бутилка или също така бавно течаща вода от чешмата, докато оттокът не стане бистър. Това обикновено отнема 5-10 секунди.
наблюдение
Не нанасяйте потока вода директно върху намазката, за да избегнете силата на същото да повреди пробата.
Ако нямате дестилирана вода, можете без проблем да използвате чешмяна вода, тъй като това няма да повлияе на резултата от оцветяването.
Стъпка 3
Плъзнете слайда с абсорбиращи хартиени кърпи в една посока и без триене. Уверете се, че долната страна на слайда е чиста.
Стъпка 4
Наблюдавайте оцветения намазка под микроскоп. Започнете с най-отдалечените цели, за да локализирате правилно зоната, която искате да наблюдавате по-подробно. Променете целта, за да се приближите и по-близо до извадката.
наблюдение
За използването на обекта с по-голямо увеличение (обикновено 100X) трябва да се използва потапящо масло, тъй като това помага на светлината да проникне по-добре и изображението да бъде по-остро. Не е необходимо да се използва покривка.
Стъпка 5
И накрая, изхвърлете всички проби в подходящ контейнер, който е правилно етикетиран "биологично опасен".
Препратки
- (2001 г.). Микробиологични приложения: Лабораторен наръчник по обща микробиология (8 -ото изд.). Компаниите McGraw-Hill.
- Хариша, С. (2006). Въведение в практическата биотехнология (1- ви). Защитна стена.
- Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Предварително оцветяване на бактерии: прости петна. Текущи протоколи в микробиологията (ДОСТАВКА 15), 1–5.
- Pommerville, J. (2013). Основите на микробиологичната лаборатория на Alcamo (10 -ти). Джоунс и Бартлет Обучение.
- Прескот, Х. (2002). Лабораторни упражнения по микробиология (5ти). Компаниите McGraw-Hill.
- Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Принципи на микробиологията (1 ст.) Tata McGraw-Hill Образование.