КОНГО ЧЕРВЕНО: ХАРАКТЕРИСТИКИ, ПОДГОТОВКА И ПРИЛОЖЕНИЯ - БИОЛОГИЯ - 2025

В червено Конго е азо багрило за протеини, образувани чрез свързване на диазониева сол и активен ароматен пръстен. Това вещество е способно да абсорбира електромагнитното излъчване във видимия спектър, поради което има интензивен цвят.

Тя е отрицателно заредена. Следователно, той има афинитет към положително заредени клетъчни компоненти, като някои протеинови вещества. Цветът му варира според pH. В този смисъл, ако средата е кисела (<от pH3), цветът е интензивно син. Между pH3 - pH 5.2 е фуксия (зона на завъртане), а с> pH 5.2 цветът е наситено червен.

Дехидратиран конго червен и конго червен колоиден разтвор. Източник: Pixinio.com и Wikipedia.com

Това е много универсално вещество, тъй като има множество приложения. Използва се като оцветител в текстилната промишленост, а също и за клетки и тъкани.

Също така да се направят културни среди, които измерват ензимното действие, като pH индикатор, като контролно вещество при оценката на правилното функциониране на спектрофотометрите, при изследването на образуването на биофилми или при диагностицирането на амилоиди.

По същия начин той направи възможно разграничаването на бактериални и гъбични серотипове чрез идентифициране на специфични структури в стената им (липополизахариди).

Характеристики на червено Конго

Това вещество е открито от Böttiger през 1884 г. Това е диазониево производно, образувано от бис-диазоената киселина на бензидин с нафтионова киселина. Червената молекула в Конго измерва 21 армстронга, а молекулното тегло е приблизително 8000 g / mol.

Конго червеното се характеризира с това, че е разтворимо във вода и още повече в органични разтворители като етанол, образувайки колоиден разтвор.

Той има афинитет към целулозата, към амилоидната тъкан и към положително заредените клетъчни компоненти.

подготовка

Конго червено се приготвя в различни концентрации в зависимост от използваната техника. Повечето използват конго червено на 1%, 2%, 0,1%, наред с други.

Например, за да се приготви 2% конго червено, трябва да се претеглят 2 g дехидратирана хранителна оцветител и да се добавят 100 ml дестилирана вода. След това се съхранява в кехлибарена бутилка.

Приложения

Като оцветител в текстилната промишленост

Известно време беше широко използван в текстилната промишленост поради фиксирането си в памука, но в момента се извежда от употреба, тъй като е канцерогенен, а също и защото цветът не е стабилен, обезцветява се чрез триене.

Определяне на способността за образуване на биофилми

Доказано е, че способността за образуване на биофилм на микроорганизми е фактор на вирулентност.

В този смисъл червеното багрило в Конго се използва като метод за определяне на образуването на биофилми. Конго червеното се свързва с екзополизахаридите, присъстващи в биофилма. Въпреки това, в сравнение с други методи, той е най-малко препоръчителен поради високите фалшиви негативи, които възникват.

Методът използва конго червен агар, той е съставен от кръвен агар като основа, глюкоза (10 g / l) и червено багрило в Конго (0,4 g / l). Щамовете, които трябва да бъдат оценени, се засяват в средата и се инкубират за 24 часа при 37 ° С и впоследствие се инкубират в продължение на 48 часа при стайна температура.

Положителен тест се доказва, ако се наблюдават кристални колонии с черен цвят и сух вид.

Контрол на качеството на спектрофотометрите

За да се прецени дали оборудване за измерване на абсорбция или транзакция отговаря на фотометричните параметри, установени от международните разпоредби, може да се използва проста техника, за да се установи дали оборудването излъчва резултати в обхвата на приемливост.

Една от техниките за оценка е използването на конго червено, базирано на изобестичната точка.

Изобестичната точка е дължината на вълната, при която червено Конго излъчва същата абсорбция независимо от рН, концентрация и температура. Стойността на абсорбцията е фиксирана и може да се използва като еталон.

Известно е, че теоретичната изобестична точка на конго червено е 541 nm. Ако получената стойност е различна, известно е, че оборудването има проблеми с дрейфа на дължината на вълната и трябва да се провери от специализиран техник.

Подготовка на средства за култура

Ortiz et al. Опишете културална среда, приготвена с конго червено багрило и карбоксиметилцелулоза, наречена CMC агар, за да се открият целулитни микробни щамове; т.е. производители на целулаза (ендоглуконези, екзоглюканази и б-глюкозидаза).

Тази среда има интензивно оцветяване. Цветът ще се разсее под действието на ензима ендоглуканаза, който нарушава структурата на карбоксиметилцелулозата. Това предполага положителна реакция.

Намаляването на вискозитета и абсорбцията позволява количествената активност на ензимите. Например при щамове на Streptomyces sp.

Идентифициране на микроорганизми

Конго червеното има афинитет към полизахаридните структури на определени щамове, като по този начин се постига идентификация на тези микроорганизми. Сред тях са Escherichia coli и Shigella flexneri.

Конго червените агарови плочи също се използват за получаване на характерни колонии, какъвто е случаят с Azospirillum sp, който дава червеночервени колонии, наред с други.

Петна от клетки и тъкани

Едно от най-често срещаните приложения на Конго червено е неговата полезност при диагностицирането на амилоидозата. Това странно заболяване се състои в извънклетъчното натрупване на анормален протеин в различни органи. Този ненормален протеин се произвежда в костния мозък и се нарича амилоид.

Конго червеното има висок афинитет към това вещество. Това свойство е използвано, за да покаже присъствието си в хистологични тъканни участъци. Конго червено се използва заедно с Хематоксилин / Еозин за тази цел.

Съединението на амилоидната тъкан и конго червеното става чрез неполярни водородни връзки между карбоксилните групи и аминогрупата. Амилоидният протеин осигурява карбоксилните групи (COOH) и Конго червената амино група.

Амилоидната тъкан е оцветена в различни нюанси, вариращи от розово до наситено червено, когато се видят под светлинния микроскоп. В микроскопи с двойно поляризирана светлина тези препарати се наблюдават с патогномонична ябълково-зелена двуподветреност.

Тоест, те представят дихроизъм, тъй като амиелоидните влакна са анизотропни. Това наблюдение потвърждава диагнозата.

Оцветяването на тъкани с Конго червено е съвместимо с други диагностични методики, като имуноцитохимични методи и дори може да бъде възстановено.

Като показател за pH

Свойството да се обръща срещу промените в pH се използва от техниката, наречена хромоендоскопия.

Тази техника използва оцветители и pH индикатори, които позволяват откриването на определени патологии. Сред тях е използването на конго червено, което може да разкрие ранни ракови огнища в стомашната лигавица, като се използва като маркер за киселинност.

Техниката се основава на факта, че конго червеното при киселинно рН е черно. Следователно, след поставянето на разтвор на конго червено върху стомашната лигавица, зоните, където има бледност, ще бъдат избрани за вземане на пробата за биопсия, тоест там, където няма производство на киселина. Това предполага наличието на раков фокус или загуба на париетални клетки.

Препратки

1. „Конго червено“. Уикипедия, Свободната енциклопедия. 8 май 2019 г., 12:13 UTC. 16 май 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Нов метод за количествено определяне на ендоглуканазната активност на базата на целулозно-конго червения комплекс. Orinoquia. 2011 юни; 15 (1): 7-15. Достъпно от: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Производство на биофилм в генотипове на Staphylococcus aureus, изолиран от говежди мастит в Куба. Rev Salud Anim., 2013 Дек; 35 (3): 189-196. Достъпно на: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Кожни прояви на системна амилоидоза като диагностичен ключ: Клиничен случай. Преподобни медик. Чили. 2012 април; 140 (4): 499-502. Предлага се в: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Спектрофотометри и фотоколориметри Практическо ръководство за актуализиране. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (септември-декември): Достъпно на: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J и Solís J. Chromoendoscopy при инфекция с Helicobacter pylori: време за реакция ли е? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Органична химия. Редакционно реверте. Барселона, Испания. Достъпно на адрес: books.google.co.ve
8. Мурило М. Хистологични техники за оцветяване на тъкани. Университет в Гвадалахара, Мексико. Достъпно на: academia.edu
9. Paillié M. Определяне на целулолитична, лигнинолитична и амилолитична активност на актинобактерии, изолирани от ризосферна почва от бяла детелина (Trifolium repens). 2012. Pontificia Universidad Javeriana Факултет на науките Индустриална микробиология Богота DC Предлага се на: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Изолация и идентификация на Azospirillum sp. върху гвинейска трева (Panicum max Jacq.) от долината Сезар. Пасища и фуражи, 2010; 33 (3): 1-8 Предлага се в: scielo.