ТИМОЛФТАЛЕИН: ХАРАКТЕРИСТИКИ, ПРЕПАРАТ И ПРИЛОЖЕНИЯ - БИОЛОГИЯ - 2025

В тимолфталейн е индикатор за рН с на научното наименование: 3,3-бис -isobenzofuranone -1 (3H) и неговата химична формула е C ₂₈ H ₃₀ O ₄. Синтезира се от фталов анхидрид и тимол.

Този показател за pH има много особени свойства, тъй като при изключително ниско рН е интензивно червен (pH <0). Впоследствие има широк диапазон на pH, при който той е напълно безцветен (pH 1 - 9,2), с диапазон на завиване между 9,3 до 10,5, където може да се промени в синьо, докато над 10,5 е син интензивен.

Химична структура на тимолфталеин при киселинно рН (безцветно) и при алкално рН (наситено синьо). Източник: Dannybalanta /Pxhere.com

Приложенията му включват да служи като индикатор за киселинни основи при определени химични реакции. Използва се също като хромоген при някои колориметрични реакции, при които се оценява ензимната активност. Например при определяне на алкална фосфатаза.

Що се отнася до токсичността, той е по-малко вреден от другите показатели за pH, като се класифицира от Националната асоциация за защита от пожар (NFPA) като ниво 1 по отношение на въздействието му върху здравето; което означава, че не е канцерогенен или мутагенен.

Той също така няма специфична токсичност срещу който и да е целеви орган; тоест представлява нисък риск от агресия за здравето. Въпреки това, директният контакт с кожата и лигавицата може да причини леко дразнене.

От друга страна, по отношение на запалимостта се класифицира като 1, а по отношение на реактивността - като нула.

характеристики

PH показателят тимолфталеин в твърдата си форма е бял прах, в течно състояние е интензивно червен при рН по-малко от нула, безцветен при рН 1-9.2 и син над 10.5. Моларната му маса е 430,54 g / mol, точка на топене (258 ° C), докато температурата на кипене варира между 248-252 ° C. Плътността е 0,92 g / mL при 25 ° С

Той е неразтворим в студена вода и разтворим в етанол. Не е взривоопасно вещество.

Като предпазна мярка по време на транспортиране, съхранение и работа трябва да се пази от силни окислители.

подготовка

За обемния анализ обикновено се използва рН индикатор тимолфталеин в концентрация 0,1%. За да направите това, продължете както следва:

- Претеглят се 100 mg тимолфталеин и се разтварят в 100 ml 95% етилов алкохол.

Може да се приготви както следва:

- Претегля се 100 mg тимолфталеин и се разтваря в 60 ml абсолютен алкохол и се добавя 40 ml дестилирана вода.

- Да се ​​съхранява при стайна температура (15 - 25 ° C). Важно е мястото за съхранение да е хладно, проветриво и без влага.

Приложения

Определяне на алкална фосфатаза

При определяне на този тест има техника, която се основава на хидролитичното действие, което алкалната фосфатаза оказва върху тимолфталеин монофосфат. Ако присъства алкална фосфатаза, тя ще хидролизира тимолфталеин монофосфат, освобождавайки тимолталеина.

Така се получава син оттенък при алкално pH. Ензимната активност на алкалната фосфатаза е пряко пропорционална на интензивността на образувания цвят. Абсорбцията се отчита при 590 nm.

Определяне на простатен антиген (PSA)

В този смисъл Shao F и сътрудници през 2018 г. разработиха колориметрична техника, при която използват мезопорни наночастици от силициев диоксид, които улавят молекулите на тимолфталеина, които са силно свързани от наличието на фенилтриметилоксисилан.

От своя страна тези наночастици са покрити с полиетиленимин (PEI), благоприятствайки свързването на вторичното анти-PSA антитяло.

От друга страна, пробата на пациента е била обездвижена върху плоча; и когато присъстващият PSA е в контакт с наночастиците, той ще се свърже с антителата. Наночастиците, които не се свързват, ще бъдат премахнати.

Впоследствие тимолфталеинът лесно ще се отдели чрез добавяне на алкален разтвор, който генерира син оттенък. Степента на оцветяване е пряко пропорционална на концентрацията на PSA.

Определяне на активността на ензима аргинин киназа или фосфокиназа

С помощта на показателя pH тимолфталеин може да се определи ензимната активност на аргинин киназата. Тестът се основава на следното:

Ензимът аргинин киназа е фосфотрансфераза, която участва в образуването на фосфоаргинин, както е разкрито в следната химическа реакция:

Източник: "Аргинин киназа." Уикипедия, Свободната енциклопедия. 10 юли 2018, 13:49 UTC. 20 май 2019 г., 03:58 wikipedia.org/

Ако тази реакция се проведе спрямо показателя pH тимолфталеин, е възможно да се измери активността на ензима. Това е възможно според следното обяснение: реакцията протича при алкално pH, при което тимолфталеинът ще покаже синия си цвят.

Ензимната активност се измерва чрез избледняване на цвета, отразен от намаляването на абсорбцията при 575 nm, тъй като при действието на ензима се отделят протони (Н +), което подкислява средата.

Това кара тимолфталеина да губи цвят, след като се приближи до зоната на завоя. Ако pH падне под 9,2, той става напълно безцветен.

Следователно интензивността на синия цвят е обратно пропорционална на ензимната активност.

токсичност

В човешкото

Това съединение е по-малко токсично от повечето pH показатели, тъй като досега не му се приписват канцерогенни или мутагенни ефекти. Тя обаче не е напълно безобидна: при контакт с кожата и лигавиците може да причини зачервяване в споменатите области.

Той може също да предизвика нежелани реакции, ако случайно бъде погълнат или вдишан.

В случай на директен контакт с кожата и лигавиците, засегнатата зона трябва да се измие с много вода за най-малко 15 минути. И ако наблюдават признаци на раздразнение, трябва да отидат до най-близкия здравен център.

Ето защо използването на предпазни средства като рокля, ръкавици и предпазни очила се препоръчва при работа.

Въпреки че имате нисък риск от запалимост, се препоръчва за предпазливост да стоите далеч от запалки.

Въздействие върху околната среда

Въпреки че е по-малко токсичен за човешкото здраве, той е токсичен във водни среди, като влияе върху организмите, открити там. Освен това той има висока биоакумулираща сила и в дългосрочен план е възможно да се образуват вредни за околната среда продукти на разграждане.

Затова трябва да се избягва, че този продукт достига до повърхностни или подземни води, тъй като би повлиял на питейната вода.

В този смисъл лабораториите, които използват този индикатор, трябва да изхвърлят отпадъците си в съответствие с действащите разпоредби във всяка държава.

Препратки

1. Pizzani P, Godoy S, León M, Rueda E, Castañeda M, Arias A. Ефект от увеличаващи се концентрации на фитичен фосфор върху активността на ензимите фитаза и алкална фосфатаза в чревния епител на младите овце. Преподобни Циент. (Маракайбо). 2008.18 (1): 59-64. Достъпно на: scielo.org.
2. "Тимолфталейн". Уикипедия, Свободната енциклопедия. 22 февруари 2019 г., 04:40 UTC. 19 май 2019 г., 22:20 часа, es.wikipedia.org.
3. Shao F, Zhang L, Jiao L, Wang X, Miao L, Li H, Zhou F. Тест за ензим без имуносорбент на простатен специфичен антиген, усилен чрез освобождаване на молекули за индикатор на рН, включени в мезопористите силициеви наночастици. Anal Chem. 2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
4. Yu Z, Pan J, Zhou HM. Директен непрекъснат рН-спектрофотометричен анализ за активност на аргинин киназа. Protein Pept Lett. 2002; 9 (6): 545-52.
5. Scharlau. Информационен лист за безопасност на Thymolphthalein. 2013.Достъпно на: javeriana.edu.co
6. Информационен лист за безопасност на Thymolphthalein. Информационен лист за безопасност. Национален университет в Ередия, Коста Рика. Предлага се в: Тимолфталеин% 20 (3).
7. "Аргинин киназа." Уикипедия, Свободната енциклопедия. 10 юли 2018, 13:49 UTC. 20 май 2019 г., 03:58 en.wikipedia.org.