МАККАРИ АГАР: ОБОСНОВКА, ПОДГОТОВКА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЯ - 2025

В агар MacConkey е твърд носител, който предоставя изключителната изолирането на Грам-отрицателни бактерии. Поради тази причина тя е селективна среда и също така позволява да се прави разлика между лактозна ферментация и неферментиращи бацили, което я прави диференциална среда. Той е един от най-широко използваните културни среди в микробиологична лаборатория.

Тази среда се използва главно за изолиране на грамотрицателни бацили, принадлежащи към семейство Enterobacteriaceae, включително опортюнистични и ентеропатогенни видове.

Агарът MacConkey сея с два вида бактерии. Ферментиращи колонии от лявата страна на лактозата, десни ферментиращи колонии без лактоза.

Може да се използва и за изолиране на други ентерични бацили, които живеят в стомашно-чревния тракт, но не принадлежат към Enterobacteriaceae, като Aeromonas sp, Plesiomonas sp, между другото.

И накрая, той може да изолира други грам-отрицателни багрили, които не ферментират с глюкоза, които се намират в околната среда, водата или почвите, но това понякога може да бъде опортюнистични патогени като Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, и други.

основа

Агар MacConkey

Основата на тази среда може да се обясни чрез описанието на нейните компоненти, тъй като всеки от тях има цел, която определя свойството му.

Жлъчни соли и кристално виолетово

В този смисъл агарът MacConkey има сложен състав. На първо място съдържа жлъчни соли и кристално виолетово.

Тези елементи са отговорни за инхибирането на растежа на Грам положителни бактерии и някои бързи грамо отрицателни бацили. От своя страна благоприятства развитието на грамо отрицателни бацили, които не са засегнати от тези вещества. Следователно това е избирателна среда.

Твърди се, че е леко селективен в сравнение с други среди, които също инхибират растежа на Грам положителни бактерии, а също и на повечето Грам отрицателни бактерии.

Пептони, полипектони и лактоза

Той съдържа вещества, които осигуряват необходимите хранителни вещества на микроорганизмите, които се развиват в тази среда, като пептони, полипектони и лактоза.

Лактозата е основната точка за средата да бъде диференциална среда, тъй като микроорганизмите, които имат способността да ферментират лактоза, ще развият силни розови колонии.

Някои бактерии могат да ферментират лактоза бавно или слабо, развивайки бледорозови колонии и оставайки лактоза положителна.

Тези, които не ферментират лактоза, използват пептоните като енергиен източник, произвеждайки амоняк, алкализирайки средата. Поради тази причина колониите, които възникват, са безцветни или прозрачни.

PH индикатор

Промяната на цвета се постига чрез друго съществено съединение, което има агар MacConkey. Това съединение е показателят за рН, който в този случай е неутрално червен.

Ферментацията на лактозата генерира производството на смесени киселини. Подкисляват средата до рН под 6,8.

Това кара показателят за pH да се обърне към наситено розов оттенък. Интензитетът на цвета може да варира в зависимост от крайното pH.

Дестилирана вода, натриев хлорид и агар

От друга страна, тя съдържа дестилирана вода и натриев хлорид, които дават средна хидратация и осмотичен баланс. Накрая, средата съдържа агар, който е основата, която осигурява консистенцията на твърда среда.

Приготвената агарова среда на MacConkey трябва да има крайно рН, коригирано на 7,1 ± 0,2.

подготовка

За един литър агарен MacConkey трябва да се претегля 50 g от дехидратираната среда, след това се поставя в колба и се разтваря в един литър дестилирана вода. След 10 минути престой се загрява, като се бърка непрекъснато до кипене в продължение на 1 минута.

След това колбата се поставя в автоклава и се стерилизира при 121 ° С за 20 минути. В края на времето той се отстранява от автоклава и се оставя да се охлади до достигане на температура от 45 ° С, за да се сервира по-късно в стерилни чашки на Петри вътре в ламинарен капак или пред горелката Bunsen.

Оставя се да се втвърди и се съхранява в обърнат държач за чиния и се съхранява в хладилник при 2-8 ° C до употреба.

За да се получи агар на MacConkey, който инхибира замаяния ефект, произведен от рода Proteus, се използва нискосолен агар MacConkey.

Използване на конвенционален агар на MacConkey

MacConkey Agar е включен във всички набори за хранителни среди, организирани за сеитба на клинични проби, получени в лабораторията. Полезен е и в микробиологията на храните и в микробиологията на околната среда.

Разнообразието от Грам отрицателни пръчки, които растат в тази среда, изразяват фенотипни характеристики, които помагат да се постави предполагаема диагноза на въпросния вид. Например размерът, цветът, консистенцията и миризмата на колониите са някои от характеристиките, които могат да ръководят.

В тази среда видовете Escherichia coli, Klebsiella sp и Enterobacter sp произвеждат силни розови колонии, заобиколени от зона на утаена жлъчка.

Докато бактериите като Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp и Hafnia sp могат да изглеждат безцветни след 24 часа или бледо розови за 24 -48 часа.

По същия начин родовете Proteus, Edwadsiella, Salmonella и Shigella произвеждат безцветни или прозрачни колонии.

Други варианти на агар на MacConkey

Има и други варианти на MacConkey Agar, които имат конкретни цели. Те са споменати по-долу:

MacConkey агар със сорбитол

Тази среда е предназначена да разграничи ентеропатогенния щам (ентерохеморагичен Escherichia coli O157: H7) от останалите щамове на Escherichia coli.

Тази среда обменя въглехидратната лактоза за сорбитола. Ентерохеморагичните щамове E. coli O157: H7 се различават от останалите, тъй като не ферментират сорбитол и поради това се получават прозрачни колонии, докато останалите щамове E. coli ферментират сорбитол, а колониите са силно розови.

Агарен MacConkey без кристално виолетово, нито сол

Този агар се различава значително от класическия агар MacConkey, тъй като няма виолетов кристал и Грам положителните бактерии могат да растат.

От друга страна, липсата на сол инхибира появата на рояк върху агара, произведен от някои ентерични бацили, като тези от рода Proteus, и по този начин улеснява изолацията на всички присъстващи бактерии, включително и грам положителни бактерии.

MacConkey агар с цефоперазон

Този вариант на MacConkey Agar е предназначен за първоначално изолиране на Laribacter hongkongensis и по-късно е установено, че е полезен за изолирането на Arcobacter butzleri. И двете са леко извити грам отрицателни пръчки, устойчиви на цефоперазон.

Тези бактерии наскоро са свързани с причиняване на гастроентерит и придобити диария при азиатски и европейски индивиди, които се очертават като два мощни нововъзникващи патогена.

Антибиотикът позволява да инхибира съпътстващата флора на стомашно-чревния тракт, което благоприятства развитието на тези бактерии, като не им позволява да останат незабелязани, тъй като те изискват 72 часа да растат.

MacConkey агар, приготвен с морска вода при 10% v / v

Този вариант е полезен за оценка на бактериални санитарни показатели за фекално замърсяване, включително общи колиформи и фекални колиформи в рекреационни солени води (плажове и заливи).

Cortez et al през 2013 г. показаха, че подготвената по този начин среда значително увеличава възстановяването на тези микроорганизми в физиологичната среда, в сравнение с използването на агар MacConkey, приготвен с дестилирана вода.

Това се дължи на факта, че модифицираната среда стимулира растежа на бактерии, които са физиологично в състояние на латентност „жизнеспособни, но не култивируеми“, следователно те не могат да бъдат възстановени в конвенционалните среди.

Препратки

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT и др. Използване на цефоперазон агар MacConkey за селективна изолация на Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. Агар MacConkey Уикипедия, Свободната енциклопедия. 4 април 2018, 18:16 UTC. 29 декември 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологична диагностика на Бейли и Скот. 12 изд. Аржентина. Редакция Panamericana SA
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологична диагноза. (5-то изд.). Аржентина, редакция Panamericana SA
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Ефект на културните среди, подготвени с морска вода, върху показателите за здравето в морските води на курортите в Чичиривиче, Фалкон, Венецуела. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Практическа клинична микробиология. Университет в Кадис, 2-ро издание. Служба за публикации на UCA.