В агар Salmonella Shigella също така известен като SS агар е селективен и диференциална среда умерено, специално предназначен за изолиране на ентеропатогенни бактерии от рода Salmonella и Shigella, двете проби околната среда като клинично.
SS агар има сложен състав; Състои се от екстракт от месо, пептон, лактоза, жлъчни соли, натриев цитрат, натриев тиосулфат, железен цитрат, агар, неутрално червена, яркозелена и дестилирана вода. Като се има предвид голямата му селективност, пробите с обилна смесена флора могат да бъдат засети.
SS агар с колонии от Salmonella sp. Източник: Manurx27, от Wikimedia Commons
В микробиологичните лаборатории средата Salmonella-Shigella се използва широко за изследване на наличието на салмонела и Shigella в проби от диариални изпражнения, канализация, питейна вода и храна.
Понякога е необходимо да се използва предварително обогатяващ бульон (лактозен бульон) и обогатяващ бульон (селенит цистинов бульон), за да се възстановят щамовете от салмонела.
Тези стъпки са необходими, когато се подозира наличието на салмонела в много малко количество или когато щамът може да бъде злоупотребен с процеси, характерни за промишленото производство, основно преработени храни. Препоръчително е също да се обогати проби от изпражнения от пациенти, които са били лекувани с антибиотици.
Впоследствие обогатеният бульон може да бъде посят върху агара на Salmonella-Shigella и други подобни среди, като ксилозен агар, лизин деоксихолат (XLD) и ентеричен хектоен агар (HE).
основа
Всеки компонент от културната среда Salmonella-Shigella има специфична функция и сместа като цяло му осигурява свойствата, които го характеризират.
Подхранваща сила
Екстрактът от месо и пептон (усвояван от казеин и животинска тъкан) осигуряват необходимите хранителни вещества (нитрогени, въглерод и витамини) за развитието на микроорганизми, способни да понасят останалите компоненти.
съгласуваност
Агар-агарът е отговорен за осигуряването на твърдата консистенция на средата.
селективен
Тази среда е силно селективна, тъй като съдържа жлъчни соли, натриев цитрат и ярко зелено. Следователно, той инхибира растежа на всички грам-положителни бактерии и повечето грамо-отрицателни бацили, включително някои колиформи.
Докато бактериите от рода Salmonella и някои видове Shigella поддържат тези съединения.
Основно родът на салмонелата е много устойчив на жлъчни соли, дотолкова, че те могат да живеят в жлъчния мехур на някои пациенти-носители, които постоянно хвърлят бактериите в изпражненията си.
диференциал
Лактозата е ферментируемият въглехидрат, който помага за разграничаване на лактоза-ферментиращите щамове от неферментиращите. Това свойство се доказва от наличието на pH показателя, който в тази среда е фенолно червен.
Лактозните ферментиращи щамове дават червени колонии, докато неферментиращите щамове са безцветни. Тази характеристика е важна, тъй като салмонелата и шигелата не ферментират лактоза.
От друга страна, тази среда съдържа натриев тиосулфат като източник на сулфид и железен цитрат като източник на желязо. И двете съединения са в състояние да диференцират бактерии, способни да произвеждат сероводород. Те реагират, образувайки видима, неразтворима, утайка от черен железен сулфид.
Това свойство се намира в някои щамове от рода Salmonella. Обикновено техните колонии са плоски безцветни с черна точка в центъра му. Останалите салмонели не произвеждат H 2 S и развива като безцветни колонии.
От друга страна, колониите от рода Shigella са плоски безцветни без почерняване.
подготовка
Тази среда е много проста за приготвяне.
Претеглят се 63 g от дехидратираната търговска среда и се разтварят в литър дестилирана вода. Загрейте разтвора и разбъркайте. Сместа може да ври до минути.
Този носител не трябва да бъде автоклавиран. След разтваряне се сервира директно върху единични или двойни стерилни чинии.
Когато се втвърдят, те се подреждат по обърнат начин върху тромбоцитите и се съхраняват в хладилник (2-8 ° C) до употреба.
Средата след приготвяне трябва да остане при pH 7,2 ± 0,2 и с оранжево-червен цвят.
Важно е да оставите плочите да се затоплят преди да се засяват пробите. Оригиналната проба може да бъде засята директно, изхвърляйки материал върху част от агара и след това да стискате оттам.
В случай че използвате обогатени бульони, прокарайте част от селенитния бульон и посейте с шпатула дригалски.
Инкубирайте при 37 ° C за 24 часа при аеробиоза.
Имайте предвид, че броят на грамовете, които ще бъдат претеглени, и крайното рН на средата може да варира от една търговска къща до друга. Средната основа винаги носи индикациите за нейното приготвяне.
употреба
Често се използва при анализ на културата на изпражненията и при микробиологично проучване на проби от отпадни води, питейна вода и храна.
Често се приготвят двойни плаки, от едната страна се поставя агар Salmonella-Shigella, а от другата XLD агар.
Ограничения
-Някои щамове Shigella не растат в тази среда. Поради това не се препоръчва за първична изолация на този род.
-Не всяка прозрачна колония с черен център е показателна за салмонела; Трябва да се проведат биохимични тестове, за да се направи правилна идентификация, тъй като колониите на някои протеинови щамове не се различават от тези на салмонела.
- Дехидратираната среда трябва да се грижи за излагането на околната среда, тъй като е много хигроскопична. Затова трябва да се съхранява в суха и добре затворена среда. Отворен за много кратки периоди.
-В течение на времето жлъчните соли в средата могат да се утаяват, образувайки изображение, подобно на рогозка в агара, но това не влияе на резултатите.
-Някои щамове Shigella могат бавно да ферментират лактоза.
QA
За да се докаже, че средата работи правилно, препоръчително е да засадите известни или сертифицирани контролни щамове и да наблюдавате дали растежът отговаря на очакваните характеристики.
За това могат да се използват щамове на E.coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium или Enterococcus faecalis.
Очакваните резултати са:
Enterobacter и Klebsiella ------ големи колонии и червени или розови мукоиди.
Shigella flexneri ---------- прозрачни или безцветни плоски колонии.
Salmonella typhimurium ------ безцветни колонии с черни центрове.
Enterococcus faecalis -------- общо инхибиране.
Препратки
- Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Агар от салмонела-шигела. 2009.Достъпна на: f-soria.es
- BD лаборатория. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013.Наличен на адрес: bd.com
- Britannia Laboratories. Салмонела-шигела агар. 2015.Наличен на: britanialab.com
- Valtek диагностика. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar). 2010 г. Достъпно на: andinamedica.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологична диагностика на Бейли и Скот. 12 изд. Редакция Panamericana SA Аржентина.
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологична диагноза. 5-то изд. Редакция Panamericana SA Аржентина.