СТЮАРТ СРЕДА: ОСНОВА, ПОДГОТОВКА И УПОТРЕБА - БИОЛОГИЯ - 2025

В среда Стюарт е полутвърда агар или бульон без хранителни вещества, използвани за транспорт на биологични проби. Целта му е да запази щамовете, присъстващи в пробата, жизнеспособни за определено време, но без да увеличават микробната популация.

Той е създаден от Moffet, Young и Stuart през 1948 г. и по-късно модифициран от Toshach и Patsula. Състои се от натриев глицерофосфат, натриев тиогликолат, калциев хлорид и агар-агар. Последното присъства в полутвърдата среда и липсва в течността. Някои лаборатории добавят към него метиленово синьо.

Култура с транспорт от Стюарт. Източник: От: CDC / Dr. Гилда Джоунс, любезност: Библиотека на образите в общественото здраве

Обикновено се използват, когато не е възможно веднага да се сее пробата. В този случай пробата се поставя в транспортната среда, докато тя се прехвърля в лабораторията, която ще обработва културата.

По този начин се гарантира, че присъстващите микроорганизми остават живи, докато не се инокулират в съответната културална среда.

Първоначално употребата му е била предназначена за транспортиране на уретрални или вагинални проби, при които се подозира наличието на Neisseria gonorrhoeae. По-късно разбрали, че полезността му може да бъде по-широка.

Средата Stuart се оказа много ефикасна за запазване на лабилни и по-бързи микроорганизми като Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, и др. В допълнение към други не дразнещи микроорганизми като Enterobacteria.

Сърдата Stuart основно предотвратява изсушаването на пробата, поддържа осмотичния баланс и запазва микроорганизмите при идеално pH. От друга страна, стратегически тази среда не съдържа хранителни вещества, като по този начин предотвратява размножаването на микроорганизмите.

На пазара има специални транспортни устройства за проби, които съдържат това или друго транспортно средство, наречено culturette. Те могат да се приготвят и в лабораторията.

основа

Целта на начина на транспорт на Стюарт е да поддържа пробите максимално близки до първоначалното им състояние, докато не бъдат обработени.

Натриевият глицерофосфат и калциев хлорид е буферна система, която работи чрез поддържане на pH и осмоларност.

Междувременно натриевият тиогликолат действа като редуциращ агент и в случай, че съдържа агар, му придава полутвърда консистенция, за да забави оксигенацията на средата. И накрая, метиленовото синьо е индикатор за окисляване, тоест открива наличието на кислород.

Полутвърдата среда с редокс индикатор е идеална за транспортиране на проби, при които се подозира наличието на анаеробни бактерии.

Характеристики на транспортното средство

Средството Stuart, като всички транспортни средства, отговаря на определени характеристики, включително:

-Поддържа жизнеспособни микробни щамове, присъстващи, без да се размножава.

-Не съдържа хранителни вещества; Съединенията му са насочени към поддържане на пробата хидратирана при подходящи pH и осмоларност.

-Инхибира автолизата на някои деликатни микроорганизми, като Пневмокок.

-Използването му е временно, не трябва да се удължава твърде дълго.

подготовка

Полутвърда среда Stuart с редокс индикатор

Подготовка за дома

Съставки

Натриев глицерофосфат 10 gr

Натриев тиогликолят 1,0 gr

Калциев хлорид 0,1 gr

Метиленово синьо 0,002 gr

Агар-агар 3 gr

Дестилирана вода 1 L

Смесете компонентите и загрейте до пълното им разтваряне. Изсипете в епруветки или специални тампони. Те се въвеждат в автоклава и се стерилизират при 121 ° С за 15 минути. Оставете тръбите да се охлаждат във вертикално положение (във формата на блок). Съхранявайте при стайна температура.

Подготовка с търговска среда

Претеглят се 14,1 g от средата в 1 литър дестилирана вода. Топлината се разклаща често, докато се разтвори напълно, може да се вари. Останалата част от процедурата, както вече беше описана.

Дехидратираната среда е кремаво оцветена и приготвената трябва да е синя по повърхността си. Това се дължи на наличието на метиленово синьо.

РН на средата трябва да се регулира на 7,4 ± 0,2

Течно модифициран Стюарт Среден (домашно приготвен)

Съставки

Натриев глицерофосфат 10 gr

Натриев тиогликолят 1 gr

Калциев хлорид дихидрат 0,1 gr

Дестилирана вода 1000 мл

Той има същите съставки като полутвърдото, но няма агар или метиленово синьо. В този случай компонентите се смесват без нагряване и 0,5 ml се разпределят в туби 16 x 125 mm с винтови капачки.

Стерилизира се в автоклав при 121 ° С за 10 минути. За вземане на проби трябва да се използват дакронови тампони, ако пробата е за PCR или район, ако е за култура.

Епруветките се съхраняват при стайна температура.

Приложения

В търговската мрежа има специални устройства за транспортиране на проби, наречени culturette; Това устройство е удължена тънка тръба, която има тампон вътре, а в края има сегмент, който съдържа полутвърдата или течна среда Stuart.

Устройството се отваря и пробата се взема с тампона. След това се въвежда обратно в епруветката, докато върхът на тампона се постави в полутвърдата транспортна среда; Някои носят полиуретанова гъба, импрегнирана с течната среда Stuart, с която пробата се запазва, когато се поддържа мокра.

В случай, че се подозира наличието на деликатни микроорганизми, за събиране на пробата трябва да се използват памучни тампони с въглен.

Пробите, които могат да се вземат с тампони или тампони и да се прехвърлят в тази среда, са фарингеални ексудати, ректални тампони и различни секрети, сред които: вагинален, уретрален, ранен, очен, отичен и абсцесен.

По време на прехвърлянето на пробата в транспортната среда в лабораторията трябва да се избягва излагането на средата на екстремни условия (твърде студено или прекалено горещо). Внезапните промени в атмосферното налягане също трябва да се избягват.

Времето, в което средата е способна да поддържа микроорганизма жизнеспособен, ще зависи от въпросния щам. Например, за микроорганизмите от рода Neisserias и Haemophilus те могат да останат жизнеспособни до 24 часа, но щамове като Salmonella или Shigella могат да продължат с дни и дори седмици.

Ако се прецени, че обработката на пробата може да отнеме повече от 4 дни, за предпочитане е пробата да бъде замразена при -70 ° С.

Идентифициране на пробата в превозното средство

Подготвеното транспортно средство или търговската култура трябва да имат етикет, на който ще бъде поставена следната информация:

Име и фамилия на пациента: избягва объркване на пробата.

Идентификационен номер: удобно е да се поддържа поръчка по време на работа.

Източник за събиране на проби: помага на бактериолога да избере подходящата среда за култура.

Посещаващ лекар: Понякога е необходимо за възможни консултации.

Дата и час на вземане на пробата: необходимо е за приемане или отхвърляне на пробата според времето, изминало между събирането на пробата и приемането в лабораторията.

Друга информация, която би била много полезна за прикачване, е:

Предполагаемата диагноза: ръководи добавянето на специални културни среди според предполагаемата диагноза.

Лечение с антибиотици: полезно е да се приложи в антибиограмата.

Цялата тази информация е жизненоважна за осигуряване на правилна обработка на пробите.

QA

За да се оцени работата на средата Stuart, известни щамове могат да бъдат инокулирани и държани при 25 ° С, като: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 63030.

Във всички случаи се очаква възстановяване на въпросния микроорганизъм, запазен за 24 часа.

От друга страна, могат да се използват и други щамове като: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 и Escherichia coli ATCC 11775.

Във всички случаи се очаква изобилно възстановяване до 96 часа.

Ограничения

Някои проучвания гарантират, че глицерофосфатът, присъстващ в Стюарт среда, може да се метаболизира от някои колиформи, сред други грамотрицателни бактерии, и следователно да се размножава в тази среда.

Този риск се увеличава, колкото по-дълго се забавя обработката на пробата. По същия начин, излагането на средата на Stuart на високи температури по време на транспортиране влияе на това.

Препратки

1. „Среда на транспорт (микробиология).“ Уикипедия, Свободната енциклопедия. 13 април 2018, 10:36 UTC. 1 април 2019 г. Достъпно на адрес: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Media Media. Стюарт транспорт. Достъпно на: Достъпно на: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Транспортните средства на Стюарт Достъпно на: lablinsan.cl
4. Научен MDM. Предимствата на наличието на Stuart микробиологична транспортна среда. Достъпно на: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratories. Стюарт. 2017.Достъпно на: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологична диагностика на Бейли и Скот. 12 изд. Редакция Panamericana SA Аржентина.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологична диагноза. 5-то изд. Редакция Panamericana SA Аржентина.