ПОТАПЯНЕ МАСЛО: СЪСТАВ, ХАРАКТЕРИСТИКИ, ПРИЛОЖЕНИЯ - БИОЛОГИЯ - 2025

На масло потапяне е вискозен бистра течност с индекс на пречупване висока. Поради тази причина той се използва широко при микроскопични наблюдения, тъй като осигурява свойството да концентрира светлина, когато преминава през 100X целта на микроскопа, увеличавайки неговата разделителна сила.

Това се дължи на образуването на вискозен филм между обектива и намазката, предотвратявайки разсейването на светлинните лъчи, когато достигнат въздуха, като по този начин концентрират светлинните лъчи към пробата.

Капкомер с маслено потапяне и микроскоп фокусиран с цел 100X, използвайки потапяне на масло. Източник: Pixabay.com

Потапящото масло се използва само с цел 100X. Ето защо целта 100X се нарича още и потапяща цел. Останалите са известни като сухи цели. Този обектив не може да се използва без потапящо масло, тъй като без него визуализацията не би била задоволителна.

Основната функция на потапящото масло е да предоставя по-ясни, по-резки и по-дефинирани изображения, позволявайки наблюдението на детайли, които с други лещи не биха били възможни.

Първото масло, използвано за тази цел, е анасоново масло, използвано заедно с първата потапяща леща, създадена от Джовани Батиста Амичи. Това само предотврати хроматичната аберация, но не увеличи числовата бленда на системата от лещи.

Тогава се използваше кедрово масло, но то имаше много недостатъци, които наложиха неговата употреба. Сред тях беше и високата му киселинност, която повреди целите в краткосрочен план.

Впоследствие други вещества като вода и глицерин бяха използвани до създаването на синтетични потапящи масла, които малко по малко се рафинираха, докато стигнат до сегашното потапящо масло, което е сложно съединение от органични вещества.

Състав на потапящо масло

Потапящото масло се състои от смес от органични съединения като: терфенил, хидрогениран терфенил, естествени въглеводороди и полибутени.

Характеристики на потапящото масло

Потапяне масло е светложълта течност, леко вискозна на външен вид, с характерна миризма и плътност между 0,92 до 0,99 г / см ³.

Потапящото масло не е разтворимо във вода и има точка на кипене 340 ° C. Индексът на пречупване a (n 20 ° C / D): варира от 1.482 до 1.516. Междувременно индексът на светкавицата е 110 ° C, а вискозитетът варира от 100 до 120 mPa.s.

Този продукт трябва да се изхвърля правилно, тъй като е екотоксичен. С други думи, той е вреден за околната среда, засяга главно водните животни. От друга страна, дразни кожата и лигавиците. При поглъщане той е нефротоксичен и кардиотоксичен.

Потапящото масло е стабилно при 15 до 25 ° C, температурата, при която трябва да се съхранява.

Основи за потапяне на масло

Когато използвате лещи с по-голямо увеличение, интензитетът на светлината трябва да се увеличи. Много от светлинните лъчи обаче се губят, защото се разпръскват при достигане на въздуха (пространство между покривалото и лещата) и дори някои лъчи са напълно отразени.

Потапящото масло има показател на пречупване, подобно на стъклото. Следователно, когато маслото влиза в контакт между лещата 100X и покривалото, светлинните лъчи се концентрират.

Концентрираните лъчи преминават през пробата и изострят изображението, тоест увеличават числовата бленда на обектива и коригират за хроматични и сферични отклонения.

Употреби или приложения

Използването на масло за потапяне е особено необходимо, когато е необходимо да се наблюдава изображение по-широк начин, като се използва най-високата цел за увеличение (100X цел), за да видите подробности, които са от съществено значение за установяване на диагнозата.

Поради това той се използва широко при микроскопични изследвания в различни области като: хистология, цитология, хематология и бактериология. Например, е полезно за изучаване характеристиките на клетките и тъканите на пациент.

Използва се и за анализ на кръвни мазки, където е необходимо да се детайлизират характеристиките на хемопаразитите вътре и извън еритроцитите, както и в препарати по Грам, за да се определят морфотинтологичните характеристики на микроорганизмите.

Обикновено се използва във фиксирани препарати, тъй като не се препоръчва в пресни препарати. Това е така, защото повърхностното напрежение на маслото кара прикритието да се движи, което води до изместване на пробата по време на наблюдението и предотвратяване на анализа.

От друга страна, потапящото масло не е полезно само при конвенционалната светлинна микроскопия: то се използва и в микроскопи за флуоресценция с вътрешно отражение (TIRFM) и в конфокални приложения за флуоресценция.

Стъпки за наблюдение на препарат, използващ потапящо масло

За да видите слайд под микроскоп, слайдът първо трябва да бъде фокусиран с цел с най-ниско увеличение, обикновено 10X, с ниска интензивност на светлината.

След това се преминава към целта 40X и светлинният път леко се увеличава. Някои анализи могат да бъдат извършени при това увеличение, но е необходимо 100X увеличение, за да видите структурни детайли.

Преди да преминете към целта 100X, капка масло за потапяне се поставя върху покривалото, точно там, където искате да наблюдавате, и след това купето на микроскопа се премества, за да се намери 100-кратната цел в препарата.

Интензитетът на светлината се регулира (увеличава) (чрез преместване на кондензатора и отваряне на диафрагмата). Тогава няколко малки движения на микрометровия винт (напред или назад) трябва да се фокусират перфектно, ако микроскопът използва парафокални цели.

Ако се опитате да фокусирате препарата директно с потапящата леща, може да имате проблеми с намирането на фокуса. Това не е невъзможно действие, но трудността се увеличава значително.

грижа

За да използвате потапящото масло, трябва да се вземат предвид определени условия.

Когато се направи оцветен препарат, като например намазка, оцветена с Giemsa или Gram, изчакайте намазката да изсъхне напълно, преди да поставите потапянето на маслото. В противен случай маслото заедно с водата ще образуват мицели, които няма да позволят на препарата да се види.

От друга страна, след наблюдаване на партидата от препарати, тоест в края на работния ден, целта 100X трябва да бъде внимателно почистена, като се използва хартия за лещи с етанол. Ако лещата се остави мръсна, маслото ще изсъхне върху нея и тогава ще бъде много трудно да я премахнете, като повредите зрителното поле.

По същия начин трябва да се има предвид, че маслото е запалимо и трябва да се пази от източници на топлина (запалки). Важно е да не се нагрява над 65 ° C.

И накрая, маслото е токсичен продукт. Затова трябва да се избягва директният контакт с кожата и лигавиците, където това може да причини леко дразнене. За да се избегнат злополуки, се препоръчва използването на ръкавици и предпазни очила.

В случай на контакт с маслото, мястото трябва да се измие с много вода. Ако маслото се пръсне в очите, то трябва да се измие по същия начин, като държите очите отворени. В случай на случайно поглъщане е важно да се поглъща топла вода и да се предизвика повръщане, в допълнение към отиването до най-близкия лекар.

Препратки

1. "Общ флуоресцентен микроскоп с вътрешно отражение." Уикипедия, Свободната енциклопедия. 30 декември 2018 г., 22:46 UTC. 14 май 2019 г., 01:54
2. IVD. Микроскопия потапяне на масло. Достъпно на: Потребители / Екип / Изтегляния.
3. Биология на околната среда и микробиология. Работа на оптичния микроскоп. Достъпно на: eumed.net/libros.
4. Санчес Лера Рита Мария, Олива Гарсия Нинфа Роза. История на микроскопа и неговото въздействие върху микробиологията. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355-372. Предлага се в: scielo.
5. Herrero J. Practice No 1: Основи и използване на общия комбиниран оптичен микроскоп. Universitat d´Alacant Достъпно на: rua.ua.es/dspace
6. Шарлау - MSDS. Потапящо масло, за микроскопия. 2001. Достъпно на: insumos-labcentral.