ANTISTREPTOLYSIN O: КОЛИЧЕСТВЕНО ОПРЕДЕЛЯНЕ, ОБОСНОВКА, ТЕХНИКА, ПАТОЛОГИИ - БИОЛОГИЯ - 2025

В О ASO е антитяло, генерирани в отговор на инфекция, причинена от Streptococcus pyogenes, известен също като Streptococcus бета-хемолитични А. Тази група произвежда два екзотоксини с хемолитични активност повиквания streptolysins "S" и "О",

Стрептолизин S е отговорен за бета хемолизата, която се проявява в кръвния агар и макар да е токсичен за определени клетки на имунната система, той не е антигенен. Докато стрептолизин О, бидейки лабилен срещу кислорода, е отговорен за хемолизата, която се появява под кръвния агар и това е антигенно.

Streptococcus pyogenes / Диаграма на случващото се в теста ASTO (реакция на аглутинация). (Антитела, свързани с латексни частици, които съдържат специфичния антиген). Източник: Потребител: Греъм Бърдс / Алехандро Порто

Следователно, когато клетките на имунната система взаимодействат със стрептолизин О, се получава специфичен имунен отговор, който генерира активирането на лимфоцитите В. Тези клетки произвеждат антитела, насочени срещу стрептолизин О. Следователно антителата се наричат антистрептолизин О.

Streptococcus pyogenes предизвиква различни патологии, сред които са: тонзилит, еризипела, импетиго, пуберпурна треска, скарлатина и септицемия. Антителата срещу стрептолизин О се появяват 8 до 30 дни след началото на инфекцията.

Повечето от тези инфекции са много чести в популацията, така че е обичайно за хората да имат антистрептолизин О антитела в кръвта си. Ниските титри показват минала инфекция с тази бактерия, но висок или нарастващ титър показва скорошна или продължаваща инфекция.

Количествено определяне на антистрептолизин О антитела

В лабораторията титърът на антистрептолизин "О" антитяло може да бъде измерен чрез серологичен тест. Тестът за антистрептолизин О (ASTO) се основава на реакция на аглутинация с латекс.

Може да се направи полукачествено, отчитането с кръстове или титърът също може да бъде количествено определен. Нормално е и не е важно да се намерят стойности до 200 IU / ml или Todd единици / ml. Над тази стойност се счита за положителна и клинично значима.

Този тест не изисква пациентът да гладува. Серумът се използва като проба, тоест кръвта на пациента се изтегля и се поставя в епруветка без антикоагулант, след което се центрофугира за получаване на серума.

Основа на техниката ASTO

Техниката използва латексови частици като опора за фиксиране на антигена стрептолизин О. Абсорбираните антигенни частици реагират със серума на пациента. Ако пациентът има антистрептолизин О антитяло, те ще се свържат с антигена, прикрепен към латексната частица.

Това свързване причинява аглутинация, която е макроскопски видима. Интензивността на реакцията е пряко пропорционална на концентрацията на антитела.

техники

- Полуколичествена техника

Интензивността на реакцията може да бъде полу количествено определена в кръстове. За да направите това, се взема серологична реакционна плака:

50 ul серум и 50 ul ASTO реагент. Разбъркайте добре с дървена клечка за зъби и поставете в автоматичен миксер за 2 минути. Спазвайте. Ако не е наличен автоматичен ротатор, той трябва да се извърши ръчно.

Интерпретация

Окачване без бучки (равномерно): отрицателно

1. + = слаба реакция

2. ++ = лека реакция

3. +++ = умерена реакция

4. ++++ = силна реакция

Положителните серуми с 3 и 4 кръста могат да бъдат количествено определени.

- Количествена техника

За количественото определяне на титра се правят серийни разреждания 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

За да направите това, процедирайте по следния начин: вземат се 4 епруветки или епруветки Kahn и върху тях се поставя 0,5 ml физиологичен разтвор. След това в първата епруветка се добавя 0,5 ml пациентен серум. Разбърква се добре. Тази тръба съответства на разреждането 1: 2.

Впоследствие 0.5 ml се прехвърлят в епруветка 2 и се смесват добре. Тази тръба съответства на разреждане 1: 4 и така нататък, докато се постигне желаното разреждане.

Вземете 50 ul от всяко разреждане и реагирайте с 50 ul ASTO реагент на аглутинационна плоча, както е обяснено в полуколичествената техника.

Интерпретация

Взема се предвид най-голямото разреждане, при което се наблюдава видима аглутинация. Изчисленията се извършват, както следва:

ASTO = Обратно на най-високото положително разреждане x чувствителността на техниката (константа).

Пример: Пациент с положителна реакция до 1: 8

ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml или Todd единици / ml.

Референтна стойност

Нормален възрастен: до 200 IU / ml

Нормални деца: до 400 IU / ml

препоръки

Препоръчително е да се монтира положителна и отрицателна контрола с пациентите, за да се гарантира, че реагентът е в оптимално състояние. Ако положителната контрола не аглутинира или отрицателната контролна аглутинира, реагентът не може да се използва.

Реакцията трябва да се интерпретира след 2 минути, след това време не е валидна, ако има аглутинация. Това са фалшиви позитиви.

Хиперлипемичните серуми пречат на реакцията. Те могат да дават фалшиви положителни резултати.

Изолираната ASTO стойност не е много полезна. Тя трябва да бъде придружена от симптомите.

Освен това е препоръчително да се извършат поне 2 измервания на ASTO, когато се подозира ревматична треска или постстрептококов гломерулонефрит, за да се демонстрира повишаването на нивата на антистрептолизин О и по този начин да се потвърди диагнозата.

Патологии с високи антистрептолизин О титри

Анти-стрептолизиновите антитела се увеличават след Streptococcus pyogenes или група A-хемолитична стрептококова инфекция.

Сред тях са: остър фарингит, скарлатина, импетиго, еризипела, пубертерална треска и септицемия.

Някои пациенти, страдащи от скорошни или повтарящи се стрептококови инфекции, могат да развият автоимунни заболявания като следствие или усложнение на постстрептококова инфекция, като остър гломерулонефрит и ревматична треска.

След стрептококови автоимунни заболявания

Ревматична треска

Това е възпалително усложнение или секела, които могат да се появят от 1 до 5 седмици след стрептококова инфекция. Титрите на антистрептолизин О се увеличават значително 4 до 5 седмици след началото на заболяването.

Високият ASTO титър ръководи диагнозата, но не е свързан с тежестта на заболяването и намаляването му не предполага подобрение.

Antistreptolysin O антитела кръстосано реагират срещу колаген и мускулни влакна, засягайки някои органи (сърце, кожа, стави и нервна система, наред с други).

Това усложнение или секела се проявява със сърдечно засягане, висока температура, неразположение, негнойна миграционен полиартрит, хорея и др.

Остър гломерулонефрит

Острият гломерулонефрит е негнойна секвела, която възниква поради отлагането на комплекси антиген-антитела върху мембраната на гломерулната база.

Образуването и циркулацията на антиген-антитяло комплекси (ag-ac), генерирани от стрептококови инфекции, могат да доведат до ексудативни промени и възпаление на гломерулите, с протеинурия и хематурия.

Тези ag-ac комплекси се отлагат в гломерула и активират каскадата на комплемента, което води до увреждане на гломерулен ендотел. Поради тази причина се счита за автоимунно заболяване, тъй като имунната система на индивида уврежда собствените му тъкани.

Антителата срещу антистрептолизин О са много високи и нивата на комплемента са ниски.

Препратки

1. Лаборатории на Винер. ASO латекс. 2000. Наличен на: wiener-lab.com.ar
2. Сътрудници на Уикипедия "Анти-стрептолизин О." Уикипедия, Свободната енциклопедия. Уикипедия, Свободната енциклопедия, 23 януари 2019. Мрежата. 19 юли 2019г.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O титър в здравето и болестите: нива и значимост. Педиатър Реп. 2012; 4 (1): e8. Предлага се в: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Как да използваме антистрептолизин О титър. Arch Dis Child Educ Practice Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Предлага се в: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Микробиологична диагноза. (5-то изд.). Аржентина, редакция Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Ръководство по медицинска микробиология. 2-ро издание, Венецуела: Дирекция на медиите и публикациите на университета в Карабобо.